Genistein对绒癌耐药细胞株JAR%2fMTX侵袭影响及其机制初步探讨.pdfVIP

复旦大学博士研究生毕土论文 Geni stei n对绒癌耐药细胞株JAR／MTX侵袭的影响及其 机制的初步探讨 中文摘要 绒癌是一种高度恶性肿瘤，早期即可发生血行转移，导致全身播散。自二十 世纪60年代以来，随着HCG监测技术的发展和化学药物的应用，绒癌的临床化 疗效果较好。但是化学药物除了能杀伤肿瘤细胞，对正常细胞也有很强的毒副作 用，因此限制了化学药物的应用。此外，部分绒癌病人可发生耐药，一旦发生耐 药往往是多药耐药，对各种化学药物均不敏感，病人预后极差，转移是其主要死 亡原因。 Genistein又名4，5，7一三羟基异黄酮，是大豆异黄酮的一种。流行病学 研究表明，Genistein能降低乳腺癌、前列腺癌、肠癌等肿瘤的发生率。许多体 内和体外实验研究表明，Genistein能抑制拓扑异构酶II的活性、抑制肿瘤细胞 的增殖、诱导分化、抑制肿瘤血管新生和蛋白酪氨酸激酶的活性，而对造血细胞、 小肠上皮细胞等正常组织细胞无明显的毒副作用。近年来体外实验研究发现， Genistein能抑制乳腺癌、纤维肉瘤和黑色素瘤细胞的侵袭，但其机制尚不清楚。 本文旨在研究Genistein对绒癌细胞生物学行为的影响及对绒癌耐药细胞株侵 袭能力的影响，探讨影响绒癌耐药细胞侵袭的相关机制，以期寻求一种安全低毒 的化疗辅助药物。 本课题共分三部分：l、Genistein对绒癌细胞株JAR生物学行为的影响； 2、Genistein对绒癌耐药细胞株JAR／MTX增殖、凋亡和侵袭的影响及作用机制； 3、ER—B在Genistein抑制绒癌耐药细胞株JAR／MTX侵袭中的作用。 第一部分Genistain对绒癌细胞株JAR生物学行为的影响 目的 了解Genistein对绒癌细胞形态学、增殖、分化、细胞周期、凋亡和 侵袭的影响。 方法在绒癌细胞JAR的培养基中加入不同浓度的Genistein， 对JAR细胞增殖的影响。采用HE染色、电镜、流式细胞术和transwell法检测 复旦太学博士研究t羊业论文 细胞周期和运动、侵袭能力的影响。体内实验，JAR细胞经Genistein处理48h， 于裸鼠背部接种皮下移植瘤，观察成瘤率的变化。 结果 Genistein能抑制 Genistein使 绒癌细胞JAR的增殖，且具有时间、剂量依赖关系。lOOnmol／ml JAR细胞HCG分泌量增加，并呈时间依赖性。与对照组比较，10、25、50和100 体内实验结果：对照组100％成瘤，实验组成瘤率16．7％。对照组瘤重1．10_-_+0．959， 结论Genistein能抑制绒癌细胞增殖， 实验组瘤重O．008_-,-0．0209(PO．05) 促进HCG分泌，导致细胞周期阻滞并抑制绒癌细胞的运动和侵袭能力。 关键词Genistein绒癌增殖分化侵袭 第二部分fienistein对绒癌耐药细胞株J／恨JMTX增殖、凋亡和侵袭的影响及作 用机制 目的 了解Genistein对绒癌耐药细胞株JAR／MTX增殖、凋亡和侵袭能力的 影响，并探讨侵袭的相关机制。方法分别采用MTT法、Annxin—V和PI双染法、 殖、凋亡和侵袭能力的变化。采用RT—PCR技术检测雌激素受体(ER)以及与侵 袭有关的MTA3、Snail基因mRNA的表达，并应用蛋白印迹法和明胶酶谱法检测 结果Genistein能抑制JAR／们x细胞的增殖和侵袭能力，并呈剂量依赖关系。 ％)，而25、50、lOOnmol／mLGenistein则引起大量细胞发生凋亡(54．84％， 因mRNA表达量减少。E—cd的蛋白表达增加，MMP一2和MMP一9的蛋白表达量减少。 结论Genistein能抑制JAR／岍x细胞的增殖，诱导细胞发生凋亡和坏死，通过 凋亡； 肿瘤侵袭 关键词Gnist91-n：绒癌；埴殖；