GB/T 4789.14-2003食品卫生微生物学检验　蜡样芽胞杆菌检验.pdf

GB/T4789.14-2003 前 言 本标准对GB/T4789.14-1994食《品卫生微生物学检验 蜡样芽胞杆菌检验))进行修订。 本标准与GB/T4789.14-1994相比主要修改如下: — 按照GB/T1.1-200。对标准文本的格式和文字进行修改。 — 修改并规范原标准中的“设备和材料”。 本标准自实施之日起，GB/T4789.14-1994同时废止。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准起草单位:中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。 本标准主要起草人:白竟玉、付萍、杨宝兰、姚景会。 本标准于1984年首次发布，1994年第一次修订，本次为第二次修订。 GB/T4789.14-2003 食品卫生微生物学检验 蜡样芽胞杆菌检验 范围 本标准规定了蜡样芽胞杆菌的检验方法。 本标准适用于各类食品和食物中毒样品中蜡样芽胞杆菌的检验。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T4789.2 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定 GB/T4789.28-2003 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂 3 设备和材料 3.1冰箱:00C-40C, 3.2 恒温培养箱:36℃士10C。 3.3 恒温水浴锅:46℃士10C。 3.4 显微镜 :lox一loox。 3.5 均质器或灭菌乳钵。 3.6 架盘药物天平:0g-500g,精确至。.5g, 3.7 灭菌锥形瓶:500mL, 3.8 灭菌试管:16mmX160mm, 3.9 灭菌吸管:1mL(具0.01mL刻度),10mL(具0.1mL刻度)。 3.10 灭菌平培养皿:直径90mm, 3.11灭菌刀、剪、镊子等。 4 培养墓和试荆 4.1 肉浸液肉汤培养基:GB/T4789.28-2003中4.1. 4.2 酪蛋白琼脂培养基:GB/T4789.28-2003中4.65, 4.3 动力一硝酸盐培养基:GB/T4789.28-2003中4.72, 4.4 缓冲葡萄糖蛋白陈水:GB/T4789.28-2003中3.4. 4.5 血琼脂培养基:GB/T4789.28-2003中4.6. 4.6 3%过氧化氢溶液。 4.7 甲蔡胺一乙酸溶液:GB/T4789.28-2003中3.17. 4.8 对氨基苯磺酸一乙酸溶液:GB/T4789.28-2003中3.17, 4.9 革兰氏染色液:GB/T4789.28-2003中2.2, 4.10 甘露醇卵黄多粘菌素(MYP)琼脂培养基:GB/T4789.28-2003中4.64. 4.11 0.5写碱性复红染色液:GB/T4789.28-2003中2.8. GB/T4789.14-2003 4.12 木糖一明胶培养基 :GB/T4789.28-2003中4.66. 5 检验程序 蜡样芽胞杆菌检验程序见图1, 图 1 6 操作步骤 6.1 菌数测定 以无菌操作将检样25g(mL)，用灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液做成10-1-10-1的稀释液按 GB/T4789.2测定。取各稀释液。.1mL，接种在两个选择性培养基一甘露醇卵黄多粘菌素(MYP)琼脂 培养基上，用L形棒涂布于整个表面，置36℃士1℃培养12h-20h,选取适当菌落数的平板进行计数， 蜡样芽胞杆菌在此培养基上的菌落为粉红色(表示不发酵甘露醇)周围有粉红色的晕(表示产生卵磷脂 酶)。计数后，从中挑取五个此种菌落做证实试验，根据证实的蜡样芽胞杆菌的菌落数计算出该平板上 的菌落数，然后乘其稀释倍数，即得每克(毫升)样品中所含蜡样芽胞杆菌数。例如:将0.1mL10-0样 品稀释液涂布于MYP平板上，其可疑菌落为25个，取五个鉴定，证实四个菌落为蜡样芽胞杆菌，则1g (mL)检样中所含蜡样芽胞杆菌数为: