GB/T 4789.29-2003食品卫生微生物学检验　椰毒假单胞菌酵米面亚种检验.pdf

GB/T4789.29-2003 前 言 本标准对GB/T4789.29-1994食《品卫生微生物学检验 椰毒假单胞菌酵米面亚种检验》进行 修订。 本标准与GB/T4789.29-1994相比主要修改如下: — 按照GB/T1.1-200。对标准文本的格式和文字进行修改。 — 规范原标准中的“设备和材料”。 本标准自实施之日起，GB/T4789.29-1994同时废止。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准起草单位:中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。 本标准主要起草人:刘秀梅、白竟玉、付萍、杨宝兰。 本标准于1994年首次发布，本次为第一次修订 GB/T4789.29-2003 食 品卫生微 生物 学检 验 椰毒假单胞菌酵米面亚种检验 范围 本标准规定了椰毒假单胞菌酵米面亚种检验的基本要求、操作程序和结果判定。 本标准适用于酵米面、变质鲜银耳及其他淀粉类发酵食品引起食物中毒的病因学诊断及椰毒假单 胞菌酵米面亚种的常规检验及菌种鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T4789.28食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂 GB/T11675 银耳卫生标准 3 设备和仪器 3.1 冰箱:4℃一一200C。 3.2 恒温培养箱:26℃士1C,36℃士1r-。 3.3 恒温水浴锅 :46℃士I*C。 3.4 显微镜:lox-l00X。 3.5 离心机:4000r/mine 3.6 架盘药物天平:。g-500g，精度0.5g. 3.7 锥形瓶:100mL,500mL. 3.8 灭菌吸管:1mL(具0.01mL刻度),10mL(具0.1mL刻度)。 3.9 灭菌平皿 :直径90mm,120mm. 3.10 灭菌试管:16mmX160mm. 3.11 离心管:30mmX100mm, 3.12 小试管:10mmx100mm, 3.13 灭菌L形玻璃棒。 3.14 灭菌透明玻璃纸、滤纸。 3.15 灌胃器:1mLe 3.16 小白鼠:18g-20g. 4 培养基和试剂 革兰氏染色液:按GB/T4789.28配制。 4.2 氧化酶试验:按GB/T4789.28执行。 4.3 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA):按GB/T4789.28配制。 4.4 马铃薯葡萄糖半固体琼脂:按4.3PDA配方，琼脂量减至。.5g/100mLe 4.5 马铃薯葡萄糖水(PD水):按4.3PDA配方，不加琼脂。 GB/T4789.29-2003 4.6 GVC增菌液(椰毒假单胞菌酵米面亚种增菌用:在高压灭菌的PD水((4.5)中，以无菌手续加龙 胆紫水溶液(最终浓度为1/1。万)氯霉素水溶液(最终浓度为20Wg/mL)混匀、分装后置4℃备用。 4.7 卵黄琼脂:按GB/T4789.28配制。 4.8 SS琼脂:按GB/T4789.28配制。 4.9 Hugh-Leifson培养基(O/F试验用):按GB/T4789.28配制。 4.10 蛋白陈水(靛基质试验用):按GB/T4789.28配制。 4.11 缓冲葡萄糖蛋白陈水(MR和VP试验用):按GB/T4789.28配制。 4.12 西蒙氏柠檬酸盐培养基:按GB/T4789.28配制。 4.13 苯丙氨酸培养基:按GB/T4789.28配制。 4.14 糖发酵管:按GB/丁4789.28配制。 4.15 半固体琼脂:按GB/T4789.28配制。 4.16 抗O多价血清、型特异性因子血清(()皿,o-iv,O-V,O-Vl,o-Vg型,-o珊型)。 5 检验程序 椰毒假单胞菌酵米面亚种检验程序见图l, GB/T4789.29-2003 6 操作步骤 6.1 增菌 用无菌操作取样品2