组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合吉西他滨对骨肉瘤mg-63 - tumor - 肿瘤.pdf

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组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合吉西他滨对骨肉瘤mg-63 - tumor - 肿瘤

520   肿瘤2013 年6 月第33 卷第6 期 TUM OR Vol. 33, J une 2013 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2013.06.007 Copyright© 2013 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 组蛋 白去 乙酰化酶抑制剂联合吉西他滨对骨 肉瘤MG-63细胞抑制作 用的研究 胡旭昌,王栓科,康学文,汪 静,安丽萍,夏亚一,狄天宁,马靖琳,王翠芳,胡杰亮 兰州大学第二医院骨科,甘肃省骨关节疾病研究重点实验室,甘肃兰州 730030 [ 摘要 ] 目的:研究组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase ,HDAC )抑制剂MGCD0103 和吉西他滨(gemcitabine ) 单药或联合作用对体外培养的人骨肉瘤细胞株MG-63 生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外传代 培养人骨肉瘤MG-63 细胞,将不同浓度的MGCD0103 (1、10 和100 µmol/L )和吉西他滨 (0.1、0.2 和0.4 mg/L )分别单独或联合作用于MG-63 细胞;采用MTT 法检测2 种药物单药或联合作用对MG-63 细胞的生 长抑制作用,并观察其有效的作用浓度;在荧光显微镜下观察细胞的凋亡情况;实时荧光定量-PCR (real-time fluorogenic quantitative-PCR ,RFQ-PCR )检测MG-63 细胞中转移相关基因1 (metastasis-associated gene 1, MTA 1 )mRNA 表达的变化,蛋白质印迹法检测p2 1、Bax 及血管内皮生长因子 (vascular endothelial growth factor ,VEGF )表达水平的变化。结果:MGCD0103 和吉西他滨单药或联合作用都能明显抑制MG-63 细胞 的生长 ( P <0.05 ),并呈剂量依赖性,MGCD0103 和吉西他滨具有协同作用。荧光显微镜下观察结果显示, MGCD0103 和吉西他滨单药或联合作用于MG-63 细胞后,大量具有凋亡形态特征的细胞出现,凋亡细胞数明 显增多;RFQ-PCR 和蛋白质印迹法检测结果分别显示,MTA 1 mRNA 及VEGF 蛋白的表达量明显下调,而 p2 1 和Bax 蛋白的表达量明显上调。结论:MGCD0103 和吉西他滨通过诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖而发挥体 外抗骨肉瘤作用,其作用机制涉及细胞周期和凋亡相关基因表达的调控。MGCD0103 和吉西他滨具有协同作用, 有望成为治疗骨肉瘤治疗的一种新手段。 [ 关键词 ] 骨肉瘤;组蛋白脱乙酰化酶类;吉西他滨;抗肿瘤联合化疗方案;MG-63 细胞 [中图分类号] R733.3 [文献标志码] A [文章编号] 1000-7431 (2013) 06-0520-06 Experimental study of MGCD0103 in combination with gemcitabine inhibiting the growth of human osteosarcoma MG-63 cells in vitro HU Xu-chang, WANG Shuan-ke, KANG Xue-wen, WANG Jing, AN Li-ping, XIA Ya-yi, DI Tian-ning, MA Jing-lin, WANG Cui-fang, HU Jie-liang Department of Orthopaedics, Orthopaedic Key Laboratory of Gansu Province, Second Hospital of Lanzhou University, Lanzhou 730030, Gansu Province, China [A BST RA CT] Objective: To investiga

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