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组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合吉西他滨对骨肉瘤mg-63 - tumor - 肿瘤
520 肿瘤2013 年6 月第33 卷第6 期 TUM OR Vol. 33, J une 2013
DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2013.06.007
Copyright© 2013 by TUM OR
Basic Research
基础研究 ·
组蛋 白去 乙酰化酶抑制剂联合吉西他滨对骨 肉瘤MG-63细胞抑制作
用的研究
胡旭昌,王栓科,康学文,汪 静,安丽萍,夏亚一,狄天宁,马靖琳,王翠芳,胡杰亮
兰州大学第二医院骨科,甘肃省骨关节疾病研究重点实验室,甘肃兰州 730030
[ 摘要 ] 目的:研究组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase ,HDAC )抑制剂MGCD0103 和吉西他滨(gemcitabine )
单药或联合作用对体外培养的人骨肉瘤细胞株MG-63 生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外传代
培养人骨肉瘤MG-63 细胞,将不同浓度的MGCD0103 (1、10 和100 µmol/L )和吉西他滨 (0.1、0.2 和0.4
mg/L )分别单独或联合作用于MG-63 细胞;采用MTT 法检测2 种药物单药或联合作用对MG-63 细胞的生
长抑制作用,并观察其有效的作用浓度;在荧光显微镜下观察细胞的凋亡情况;实时荧光定量-PCR (real-time
fluorogenic quantitative-PCR ,RFQ-PCR )检测MG-63 细胞中转移相关基因1 (metastasis-associated gene 1,
MTA 1 )mRNA 表达的变化,蛋白质印迹法检测p2 1、Bax 及血管内皮生长因子 (vascular endothelial growth
factor ,VEGF )表达水平的变化。结果:MGCD0103 和吉西他滨单药或联合作用都能明显抑制MG-63 细胞
的生长 (
P <0.05 ),并呈剂量依赖性,MGCD0103 和吉西他滨具有协同作用。荧光显微镜下观察结果显示,
MGCD0103 和吉西他滨单药或联合作用于MG-63 细胞后,大量具有凋亡形态特征的细胞出现,凋亡细胞数明
显增多;RFQ-PCR 和蛋白质印迹法检测结果分别显示,MTA 1 mRNA 及VEGF 蛋白的表达量明显下调,而
p2 1 和Bax 蛋白的表达量明显上调。结论:MGCD0103 和吉西他滨通过诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖而发挥体
外抗骨肉瘤作用,其作用机制涉及细胞周期和凋亡相关基因表达的调控。MGCD0103 和吉西他滨具有协同作用,
有望成为治疗骨肉瘤治疗的一种新手段。
[ 关键词 ] 骨肉瘤;组蛋白脱乙酰化酶类;吉西他滨;抗肿瘤联合化疗方案;MG-63 细胞
[中图分类号] R733.3 [文献标志码] A [文章编号] 1000-7431 (2013) 06-0520-06
Experimental study of MGCD0103 in combination with gemcitabine inhibiting the growth of human
osteosarcoma MG-63 cells in vitro
HU Xu-chang, WANG Shuan-ke, KANG Xue-wen, WANG Jing, AN Li-ping, XIA Ya-yi, DI Tian-ning,
MA Jing-lin, WANG Cui-fang, HU Jie-liang
Department of Orthopaedics, Orthopaedic Key Laboratory of Gansu Province, Second Hospital of Lanzhou University,
Lanzhou 730030, Gansu Province, China
[A BST RA CT] Objective: To investiga
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