粉尘螨变应原der f mag 29 的克隆 - 中国寄生虫学与寄生虫病杂志.pdf

中中国国寄寄生生虫虫学学与与寄寄生生虫虫病病杂杂志志 年年 月月第第 卷卷第第 期期 文章编号 研究简报 粉尘螨变应原 的克隆、表达及生物信息学分析 孙金霞，俞黎黎，周鹰，卞勇华，杨李，王楠，崔玉宝 【提要】 提取粉尘螨总 根据 中的序列 登录号为 设计并合成引物 扩增 全长基因 克隆至 载体 转化至大肠埃希菌 取阳性克隆测序鉴定 将 质粒转化至 异丙基 硫代半乳糖苷 诱导表达 十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 验证表达产物 采用生物信息学软件预测 的结构 理化特性和生物进化关系 产物电 泳结果显示 在 处有一条带 与 基因大小一致 测序鉴定表明质粒构建成功 结果显示 表 达产物的全细胞 上清和沉淀物中均有相对分子质量 为 的蛋白表达 与预测值一致 其中上清中蛋白表 达量高于沉淀 生物信息学分析显示 该蛋白是由 个氨基酸组成的 的分子 二级结构由 螺旋 延伸主链 和无规则卷曲 组成 是亲水性细胞质蛋白 与热休克蛋白 家族具有较高 同源性 【关键词】 粉尘螨；变应原；生物信息学 中图分类号 文献标识码