茶多酚干预豚鼠胆色素结石形成的药理药效研究.pdfVIP

科 科I技l论坛 茶多酚干预豚鼠胆色素结石形成的药理药效研究 李继红 朱丽霞z (1、南阳理工学院生化学院，河南，南阳 473004 2、南阳理工学院校医院，河南，南阳473004) 摘 要：观察茶多酚对豚 鼠胆色素结石的干预作用，并从分子层面探讨茶多酚对豚 鼠胆色素结石的影响机制。方法：用致石饲料建立豚鼠的胆 色素结石模型，用药组用 0．5％，1％的茶多酚作为唯一饮用水进行饲喂，比较各组豚鼠的死亡率及成石率，并检测血脂、LDLR及UGT1AlmlLNA的 表达，结果表明，茶多酚的饲喂能够降低由致石饲料诱导的豚鼠的死亡率及成石率，改善血脂指标，并能够明显地提高LDLR及uGT1A1m躲NA的 表达，提示茶多酚能够有效地干预由致石饲料诱导的豚鼠胆石症的发生。 关键词：胆色素结石；茶多酚；血脂；LDLRmRNA；UGT1AlmP．NA 胆色素结石是我国常见的消化道疾病，其发 素结石；St一小块肝脏，迅速投入液氮中，后保存 近正常，与模型组相比有显著性差异 (PO．O01)， 生机制还不是很清楚，目前也没有满意的治疗药 在 一80℃冰箱中，用于mRNA表达的测定。1．23 且具有剂量依赖性。与模型组相比，用药组TG略 物。茶多酚是从绿茶中提取的活性成分，大量报道 血脂的测定。按试剂盒提示的方法测定TG、TC、 有降低 (低剂量组和高剂量组的P值分别小于 证明其具有降血脂、抗菌消炎、抗氧化、抗肿瘤等 LDL、HDL。1．2．4半定量RT—PCR。用Trizol提取 0．05和0．01)；高剂量组HDL—C略有升高 (P 作用 ，并能够提高LDLR的表达活性目。又有报道 总RNA，在2Ol逆转录体系中以MMLV反转录 0．05)，币 氐剂量组无显著性差异。 证实茶多酚具有提高尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移 酶逆转录合成第—链cDNA。以第—链cDNA为 表2 各组动物的血脂水平比较陋s) 酶(b—uGT)的活性的药理作用日，而这些作用与改 模版，进行PCR扩增LDLR，UGT1A1，内参照为 善胆色素结石的各项病理指标密切相关。本研究 B—actin。引物设计如下 ：LDLR上游引物为 用上海中医药大学附属龙华医院的徐长生，朱培 5-ATITrGGAGGATGAGAAGCAG一3’，下游为 庭教授研制低蛋白饮食方法建立了豚鼠的胆色素 5’一CAGGGCGGGGAGGTGTGAGAA一3’；UGTIAI 结石模型 ，并用0L5％和 1％的茶多酚作为唯一饮 上游引物为 5-AcTGGGCAAcGCTAAGAAGG一 用水进行饲喂，通过观察对照组、模型组、用药组 3’，下游为 5-ACTGGGCAACGCTAAGAAGG一 的生理状况、死亡率、成石率及血脂、LDLRmRNA 3’。 B—a 和UGT1A1的指标，探讨EGCG对胆色素结石模 ctin上游引物为 5-CACGATGGA GGG 型豚鼠的药理学作用及作用机理。 GCCGGACTCATC一3．‘下游引物为5-TAA 与模 型组比较 ，*P0．001，AP0．01。#P 1实验材料和方法 AGACCTTGCCAACACAGT一3’，预期扩增片 0-(】5 1-1实验材料。1．1．1实验动物。雌I生白色红 目 断的长度为 LDLR931bp，UGT1A1262bp，240 2．3LDLR及 UGT1A1mRNA的表达。如表 豚鼠，2月龄，体重280g：t：10g，清洁级，共 60只，由 bp。分别扩增出IDLR，UGT1A1，p—acfin，然后以 3所示，模型组动物肝组织LDLR及UGT1A1 上海中医药大学实验中心提供，实验动物合格证 B—actin为内参照调节加样量使其达到亮度 (丰 mRNA的表达明显低于正常组和高剂量组 (P 号：SCXK(2002—0011)。1．12饲料。造模用致石性 度)一致，再按 B—aetin的加样量加 LDLR和 0．05)，而高剂量组LDLR及UGT1A1mRNA的表 饲料，在正常饲料基础上添加致石药物。具体配方 UGT1A1的PCR产物，1％琼脂糖凝胶电泳检测扩 达均有明显的提高 (Po_05)；低剂量组中， 为：正常饲料45．43g，致石性药物457g(其中酪蛋 增产物，经凝胶分析软件对电泳条带进行灰度分 LDLRmRNA