socs1拮抗物pjak2多肽可增强树突状细胞的抗肿瘤作用 - tumor.pdf

肿瘤2013 年6 月第33 卷第6 期　TUM OR Vol. 33, J une 2013　　 509 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2013.06.005 Copyright© 2013 by TUM OR Basic Research 基础研究 · SOCS 1拮抗物pJAK2多肽可增强树突状细胞的抗肿瘤作用 1, 2 1, 2 3 2 2 3 2 2 2 何蕙香 ，陈玉强 ，颜江华 ，丁　园，王勇军 ，王生育 ，叶燕华 ，许英艺 ，李巧珍 1. 南昌大学医学院，江西 南昌　330000 ；2 . 中国人民解放军第一七四医院肿瘤治疗中心，福建 厦门　361003 ； 3. 厦门大学医学院抗癌研究中心，福建厦门　361005 [ 摘要 ]　目的：探讨细胞因子信号转导抑制因子-1 （suppressors of cytokine signaling 1，SOCS1 ）拮抗物pJAK2 多肽 （氨基酸序列号为1001—1013 ）参与树突状细胞 （dendritic cells ，DCs ）的体外诱导培养后对DCs 抗肿瘤作 用的影响。方法：采集健康人外周血，离心获得单个核细胞，用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 （recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor ，rhGM-CSF ）及重组人 白细胞介素-4 （recombinant human interleukin-4 ，rhIL-4 ）诱导DCs ，第5 天分为4 组：单纯DCs 培养 （对照）组、抗原负载 （Lysate-DCs ） 组、多肽修饰 （pJAK2-DCs ）组和抗原与多肽共培养 （Lysate ＋pJAK2-DCs ）组，第6 天各组加入肿瘤坏死因子-α （tumor necrosis factor-alpha ，TNF-α ）促成熟。倒置显微镜下观察DCs 形态；FCM 法检测DCs 表型；乳酸脱氢 酶 （lactate dehydrogenase ，LDH ）细胞毒实验检测各组细胞毒性T 淋巴细胞 （cytotoxic T lymphocyte ，CTL ）对 γ γ 胃癌细胞BGC-823 的靶向杀伤作用；ELISA 法检测白细胞介素-12（interleukin-12 ，IL-12 ）和 干扰素（interferon- ， IFN-γ ）的水平。结果：与未加入诱导剂组相比，各组均成功诱导出成熟DCs ，均高表达CD80 、CD83 、CD86 和人类白细胞DR 抗原 （human leukocyte antigen DR，HLA-DR ），但以Lysate ＋pJAK2-DCs 组的表达水平最高。 ： ： ： 在10 1 ～30 1 的效靶比范围内，CTL 杀伤作用与效靶比呈正相关。当效靶比为30 1 时，对照组的CTL 杀 P ＜0.01 ），而Lysate ＋pJAK2-DCs 组较Lysate-DCs 组及pJAK2- 伤率达 （19.77 ±2 .34 ）% ，低于其他3 组 （ DCs 组都高（P ＜0.05 ）。Lysate ＋pJAK2-DCs 组培养上清液中