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离子交换层析复性重组人y一干扰素折叠二聚体的形成
浙江大学学报(农业与生命科学版)32(1):101~105,2006
Journalof LifeSci.)
ZhejiangUniversity(Agric.8L
文章编号:1008-9209(2006)01一0101一05
离子交换层析复性重组人Y一干扰素折叠二聚体的形成
靳挺1’2,关怡新1,姚善泾1
(1.浙江大学化学工程与生物工程学系,浙江杭州310027;2.浙江大学宁波理工学院生物与化学工程分院,浙江宁波315100)
Fast
摘要:SPSepharoseFlow离子交换层析柱作为蛋白质复性系统,采用尿素梯度法进行重组人r
干扰素包涵体蛋白质的复性实验.结果表明,尿素梯度离子交换层析法能有效地复性重组人r干扰素
包涵体,复性后的重组人r干扰素的纯度迭95%,蛋白收率达54%,比活为7.5×105
IU.mg~.以
Superdex75凝胶作为体积排阻层析介质,对离子交换层析复性的样品进行分析,表明离子交换层析复
性的样品中没有重组人r干扰素聚集体存在.荧光光谱分析表明重折叠的重组人r干扰素的构象接近
于其天然二聚体构象.
关键词:重组人r干扰素;包涵体;复性;离子交换层析;荧光光谱分析
中图分类号:Q511 文献标识码:A
JIN Yi—xinl,YAO ChemicalandBiochemical
Tin91一,GUAN Shan-jin91(j.Departmentof
310027, Biochemical
Engineering,ZhejiangUniversity,HangzhouChina;2.Collegeof
Institute 315100,China)
Engineering,NingboofTechnology,Zh巧iangUniversity,Ningbo
Formationofdimersin ofrecombinanthuman
refolding interferon-yion-exchange
by chromatography.
of
JournalZhejiangUniversity(Agric.&LifeSci.),2006,32(1):101-105
Abstract:The was theconcentrationofureainthe
refoldingprocessperformedbygraduallydecreasing
after
buffer thedenaturedrhIFN一7 hadbeenboundontothe SP Fast
proteins ion-exchangegel Sepharose
Flow.Resultsshowedthatthedenatured wasrefolded
rhIFN一_y efficientlybyion-exchange
withaurea andthe oftherefolded wasto
chromatographygradient purity rhlFN-yup 95%.The
protein
was54%
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