用圆二色性和荧光光谱技术研究纳米吡啰红g核2铁蛋白的构建机理.pdf

Vo l. 3 1 高 等 学 校 化 学 学 报 No. 5 20 10 年 5 月 　　　　　CHEM ICAL JOURNAL OF CH IN ESE UN IV ER SITIES　　　　　 　 896 ～904 　 用圆二色性和荧光光谱技术研究纳米 吡啰红 G核 铁蛋白的构建机理 1 1, 3 1 1 1 2 1, 2 , 3 陈盈盈 , 黄 　琳 , 季学涛 , 林 　青 , 陈　平 , 柯才焕 , 黄河清 ( 1. 厦门大学生命科学学院生物化学与生物技术学系 , 2. 海洋与环境科学学院 , 近海海洋环境科学国家重点实验室 , 3. 化学化工学院 , 福建省化学生物学重点实验室 , 厦门 361005) ( ) 摘要 　小批量制备了电泳纯鲨鱼肝铁蛋白 L iver ferritin of Sp hy rna zy g aena , SZLF , 对 SZLF 的结构与功能进 ( ) 行了研究. 在 pH = 20 ～100条件下 , 选用圆二色性 Circu lar dichroism , CD 光谱技术研究了 SZLF 和脱铁 ( ) 核 SZLF apoSZL F 二级结构转换的基本特征和变化趋势 , 揭示了 SZLF蛋白壳的亚基稳定性 、相互作用强度 和去折叠现象. 利用酸碱中和方法 , 解离 SZLF蛋白壳亚基 , 并再次构建成完整 SZLF. 用紫外 可见分光光度 法和荧光光度法研究了构建纳米吡啰红 G核 铁蛋白的途径. 定量分析结果表明 , 每分子 apoSZLF可捕获 12 分子吡啰红 G于蛋白壳内, 构建纳米吡啰红 G核 铁蛋白. 分析了 apoSZLF直接捕获和释放吡啰红 G的途径 与速率 , 为后续构建高存量纳米顺铂核 铁蛋白药物载体提供了可行性技术. 关键词 　铁蛋白; 结构转换 ; 纳米吡啰红 G核 铁蛋白; 光谱分析 中图分类号 　O657　　　　文献标识码 　A 　　　　文章编号 (20 10) 在自然界中 , 多数动植物及微生物细胞中均存在着一种高效和高存量储存无机铁磷的蛋白质 [ 1 ] . 铁蛋白分子结构主要由蛋白壳 、铁核和横跨蛋白壳的物质隧道组成 [ 2 , 3 ] , 其中蛋白壳由 24 个同一类型 ( ) [ 4 , 5 ] [ 1, 2 ] 或不同类型 H 和 L 的亚基组成 , 铁核由数千个无机铁氧化合物和数百无机磷酸盐组成 . 与细 α 胞色素 C类似 , 铁蛋白亚基由 4 螺旋束结构构成 , 在金属电极或修饰电极上均表现出非电惰性特点 , 即可以从金属电极中接受还原电子 , 并转化成化学能 , 供自身铁核进行氧化还原反应 [ 6, 7 ] , 这一特点与 铁蛋白特殊亚基结构和高对称性亚基排布组合有关 , 但采用铁蛋白电极直接测定生物大分子的氧化还