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第二十二章 紫外-可见分光光度法 学习目标 ※知识目标 ◆了解光谱分析的基本概念 ◆熟悉紫外-可见分光光度法的工作原理 ◆掌握朗伯-比尔定律的意义用应用条件 ◆掌握紫外-可见分光光度法的应用 ※能力目标 ◆能够操作常见的紫外—可见分光光度计 ◆能够应用紫外—可见分光光度法进行物质的定量分析 第一节 概 述 一定频率或波长的电磁波(光)与物质内部分子、电子或原子核等相互作用，物质吸收 电磁波的能量，从低能级跃迁到较高能级。被吸收的电磁波频率(或波长）取决于高低能级 的能级差。通过测量被吸收的电磁波的频率(或波长)和强度，可以得到被测物质的特征波谱， 特征波谱的频率(或波长)反映了被测物质的结构特征，可用来作定性分析，波谱的强度则与 物质的含量有关，可用于定量分析。利用物质对电磁波的选择性吸收对其进行分析的方法统 称为光谱分析。 一、光谱分析的基本概念 (一)电磁波的基本性质和分类 电磁辐射又称为电磁波，是一种在空间高速传播的粒子流，它的传播不受媒介限制。 光是一种电磁波，电磁波具有波动性和粒子性。光的衍射、干涉及偏振等现象证明了其具有 波动性，电磁波的波动性还体现在它有波长、频率等类似于机械波的特性。电磁波的波长、 频率和光速之间的关系为： c ν = (22-1) λ 式中ν为频率，表示每秒钟光的振动次数，单位用赫兹(Hz)来表示；c 是光在真空中的传 10 -1 播速度，在真空中所有电磁波的传播速度都相同，并达到最大值，为3×10 cm·s ；λ为波长， 表示在传播方向上具有相同振动相位的相邻两点间的直线距离，单位常用纳米(nm)表示。 －3 电磁波的波长从10 nm~1000m，覆盖了非常宽的范围，为了便于研究，根据波长（频 率）大小将电磁波划分为若干个区域（见表22-1）。不同区域的电磁波对应于分子内不同层 次的能级跃迁。 22-1 22-1 表2222--11 电磁波谱区域及光学分析方法 400 光谱区 波长范围 跃迁类型 分析方法 -3 γ射线 10 ～0.1nm 核能级 X射线 0.1～10nm 内层电子能级 X射线光谱法 远紫外区 10～200nm 内层电子能级 真空紫外光度法 近紫外区 200～400nm 价电子或成键电子能级 紫外光度法 可见光区 400～760nm 价电子或成键电子能级 比色及可见光度法 近红外区 0.76～2.5μm 分子中涉及氢原子的振动 近红外光光度法 中红外区 2.5～50μm 分子中原子的振动及分子的中红外光光度法 远红外区 50～1000μm 转动 远红外光光度法 微波区 0.1～1