第9章分子荧光和磷光分析法.pdf

第9章分子荧光和磷光分析法 9.1.1 光致发光的基本原理 9.1.2 分子光致发光与结构间的关系 9.1.3 荧光强度的影响因素及测定步骤 9.1.4 荧光（磷光）光谱仪 9.1.5 荧光和磷光分析法的应用 1 光致发光的基本原理 荧光现象的发现 2 Excitation and emission spectra of anthracene 3 荧光和磷光体系能级示意图 4 激发光谱和发射光谱 激发光谱：物质分子选择性地吸收某一波段 的光产生的光谱。激发光谱为荧光强度与激发波 长的关系曲线。 发射光谱：受激发光照射时，荧光（磷光） 物质发射的光谱。如果固定激发光波长为激发光 谱峰值所对应的波长，然后测定不同波长时所发 射的荧光（或磷光）强度，即得荧光（磷光）光 谱曲线。 荧光和分子结构的关系 1) 跃迁类型 激发 π →π*, n →π* 发射 π* →π, π* →n n →π* π →π* ε 与 跃迁相比， 跃迁的 大100 ~ 1000倍，寿命较短，通过系间窜跃至三重 态的速率也较小，因此π* →π 跃迁的荧光 效率较高。 2) 共轭效应 化合物 ϕ λ/nm 苯 0.07 283 萘 0.29 321 蒽 0.46 400 一般而言，π电子共轭体系越大，荧光效率 越高，且荧光光谱红移。 H H C C H C C H 强荧光 无荧光 3) 刚性平面结构 O O - O O O C C - COO COO- 酚酞(无荧光) 荧光素(强荧光) 刚性平面结构可减少分子的振动，使分子与溶 剂和其它溶质分子的相互作用减小，因而有利 于提高荧光效率。 4) 取代基效应 化合物