紫茎泽兰有毒成分筛选.pdf

紫茎泽兰有毒成分筛选 董 强，芦 岩，顾 强，赵宝玉 （西北农林科技大学动物科技学院，陕西杨凌 712100 ） 摘 要：为了筛选紫茎泽兰有毒成分，并确定其毒性，通过紫茎泽兰五部位浸膏对小鼠毒性试验，筛选毒性较大部位， 对其进行急性毒性试验，并剖检死亡小鼠和进行病理学检查。结果发现筛选出石油醚和乙酸乙酯部位为毒性较大部位，急性 毒性试验表明石油醚部位提取物LD50值及 95％可信限为 29.57±2.42g/kg，乙酸乙酯部位提取物LD50值及 95％可信限为 18.11±1.51g/kg，剖检死亡小鼠可见胃肿胀，肝脏有细小出血点，其它脏器眼观变化不明显。 关键词：紫茎泽兰；小鼠；毒性试验；有毒成分筛选 紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum Spreng)属双子叶植物,菊目菊科泽兰属多年生草本或成半灌木状 植物，是 20世纪 50 年代左右从东南亚传入我国的有害杂草，广泛的分布于云南、贵州，遍及四川、广西、 西藏等地，且仍在不断地朝华中和华东方向漫延,预计很快入侵整个长江以南各省区,人们称之为“绿色杀 手”。紫茎泽兰多侵入农田（丢荒轮歇地）、草地、路边、宅旁、经济林地和森林[1]。据调查在我国西南地 区，其侵占草场，抑制多种牧草生长，植物成分测定其营养性能低。不但使放牧牛，羊，马，猪等因缺草 变得体质瘦弱，继发多种疾病而死亡，而且其自身具有易挥发性成分，对人和家畜具有接触性致敏毒性， 并可引起羊蹄腐烂，马腹泻，气喘等毒性作用[2，3]。据悉，2003年3月，在国家环保总局公布的首批入侵国 内的16种外来物种黑名单中，紫茎泽兰名列第一，与棘豆、栎树同为我国草地的三大毒草[4]。紫茎泽兰的毒 性研究虽有一定进展，但其具体有毒成分及其毒性大小还有待研究。本试验通过紫茎泽兰五部位浸膏对小 鼠毒性试验，筛选出毒性较大部位，并验证其毒性作用，对进一步研究其化学成分和确定其毒性大小有一 定的意义。 1 材料与方法 1.1 实验材料与动物 紫茎泽兰采自云南昆明，依据文献对紫茎泽兰干草粉五部位提取，得到紫茎泽兰石油醚，乙酸乙酯， 氯仿、乙酸乙酯、正丁醇五部位浸膏[4]；其它为常规试剂和仪器。购自第四军医大学试验动物中心的清洁 无菌的昆明种小白鼠 120 只，雌雄各半，体重 18－22g。 1.2 实验方法 1.2.1 紫茎泽兰乙醇浸膏五部位提取物毒性预试验 随机选取昆明小鼠 20 只，雌雄各半，分为 5 组，每组 4 只。参考相关文献[5，6]，按 25g/kg和 50g/kg 两种剂量分别配制各部位提取物，分别对各组小鼠进行灌胃，每剂量灌注两只小鼠。观察记录小鼠的死亡 情况，得出毒性较大的部位。 1.2.2 石油醚和乙酸乙酯部位提取物LD50测定 通过上述紫茎泽兰乙醇浸膏五部位提取物毒性确认预试验，得出石油醚和乙酸乙酯部位提取物毒性较 大，并对其进行LD50测定。 LD 测定预试验（D ，D 测定） 将健康小鼠随机抽取 20 只，分为 10 组，每组 2 只。参照石油醚 50 n m 部位和乙酸乙酯部位提取物毒性确认试验结果，设计有毒剂量。石油醚部位按剂量 50g/kg、40g/kg、30g/kg、 20g/kg、10g/kg，乙酸乙酯部位按剂量 30g/kg、24g/kg、18g/kg、12g/kg、6g/kg，分别给小鼠口腔灌服 [7] 石油醚和乙酸乙酯部位提取液。观察死亡率，找出有毒部位及估计其 0%和 100%致死量（D ,D ） 。 n m 正式试验（LD 测定） 购进小鼠前用来苏尔对饲养场所进行彻底消毒，消毒后在鼠罐中放入一 50 定量的锯木和刨花。购入小鼠后先饲喂 3 日，再对小鼠进行称重，记录数据并抽取 88 只健康小鼠，随机 分为 11 组，分别编号为 1－11 组，每组 8 只，雌雄各半，第 11 组为对照组。第 1－5 组进行石油醚部位