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人软骨寡聚基质蛋白(comp)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
人软骨寡聚基质蛋白(COMP)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关
液体样本中软骨寡聚基质蛋白(COMP)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人软骨寡聚基质蛋白(COMP)水平。用纯化的人软
骨寡聚基质蛋白(COMP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入软
骨寡聚基质蛋白(COMP),再与HRP 标记的COMP 抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合
物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作
用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的软骨寡聚基质蛋白(COMP)呈正相关。用酶
标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人软骨寡聚基质蛋白
(COMP)浓度。
试剂盒组成:
试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存
说明书 1 份 1份
封板膜 2片(48) 2 片(96)
密封袋 1 个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品:9μg/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
20 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 30ml×1 瓶 2-8℃保存
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心
20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次
离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/
分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞
1
浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分
钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器
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