遗传性蛋白c缺陷症家系的一个基因突变.pdf

维普资讯 tolMarch2003,Vol24,No．3 2OO3年 3月第 24卷第 3期 ChinJH—e~ , — — — · 论 著 · 遗传性蛋 白C缺陷症家系的一个基 因突变 刘丽 郭文茹 贺立山 穆红 江雁 黄繁嫱 李家增 摘【要】 目的 研究一个遗传性蛋 白c(PE)缺陷症家系的遗传表型及基因特征。方法 Pc活性 用凝固法测定，Pc抗原用 ELISA方法测定。用 PER扩增 2代家系 12个成员中4个 Pc活性及抗原减 低的PcⅡ Ⅸ号外显子片段 ，用单链构象多态性(SSCP)分析 cDNA变性后 的差异 ，用测序法检测突变 点 。用限制性酶切验证突变点 ，同时分析家系的基因型。结果 该家系 2代 4名成员 Pc抗原水平在 34．3％ 67．8％(参考值 80％ 120％)。Pc活性在 22％～49％(参考值 70％一130％)，较正常参考范围 明显减低。限制性酶切分析该家系 12名成员时发现 9名成员存在基因的突变。基因突变位点在Ⅶ号 外显子第 6219位核苷酸G—A突变 ，使正常编码的CGG精氨酸突变为 CAG谷氨酰胺 。结论 该家系 为 I型 Pc缺陷症 ，基因分析证明先证者为杂合子型。在 PcⅦ号外显子上第 6219位核苷酸 G—A突 变，在蛋白质合成过程中第 169位精氨酸被谷氨酰胺替代 (R—Q)，为 目前 国内文献 中尚未报道的一个 基因突变点 。 【关键词l 蛋白c； 基因突变； 单链构象多态性； 家系 A pointnmtafionofproteinC geneinaemgenitalpr咖eiIIC deficiencypedi (， ，G∞ Wen-ru， HE shan，MUHong．JIANGYah，HUANGFan-qiang，1_1】 zeng．’InstituteofThrombosisandItemostasis， Tian~nFirstCentralHospita1．Tiantin 300192，China ． A【bstract】 Objective TostudythephenotypesandgenotypesofaproteinC(PC)deficiency0deigree． Methods Immunoassay(EUSA)wasusedforPCnatigenandactivatedPC(APC)detection，PERforamplification 0fthefragmentofproteinCgeneexon1ItoexonIX．single-strandconformationpolymorphism(sscP)fordiffer- enceof denatured cDNA andDNA sequencingforgenemutation．Results Fourmembersin thep~aisree were ofundtobePC antigenlevelsbLt~ween43 ．3％ 一67 ．8％ nadPC activitybetween22％ 一49％ whichaIelowerin comparisonwithiltorlnalreferences(80％ 一102％ nad70％ 一130％，respectively)．AG-to-AmutationinexonⅦ oftheproteinCgeneat6219positionW$tSidentifide in9members．Thismutationr~ultde nithesubstitutionof forGin砒 169aminoacid．Cetldutaen ，I1leprobandiSofheterozygosiyt． eG6219AmuattioninexonⅦ ofthe proteinC geneleadstothesu