第十章微生物的遗传变异及育种第一节遗传物质的物质基础.ppt

（3）、溶源转变 当温和噬菌体感染宿主而使其发生溶源化时，因噬菌体的基因整合到宿主的核基因组上，而使后者获得了除免疫性以外的新性状的现象，称为溶源转变。 性质：表面上与转导相似，而本质上不同于转导。 （3）、溶源转变 区别： 当宿主丧失其原噬菌体时，通过溶源转变而获得的新性状也随之消失 温和噬菌体不携带来自供体菌的外源基因，是噬菌体自身基因使宿主获得新性状 温和噬菌体使完整的，不是缺陷的 获得新性状的是溶源化的宿主细胞，不是转导子 白喉棒杆菌：白喉毒素/?温和噬菌体 肉毒梭菌：C型或D型肉毒毒素 红霉素链霉菌：合霉素合成和气生菌丝形成/P4温和噬菌体 逐个检出法 影印检出法 夹层培养法 限量补给法 在含少量的（0.01%）蛋白胨的MM上培养, 大菌落为野生型 小菌落的为缺陷型。 鉴定缺陷型 生长谱法 组合营养物法 组合补充培养基法 生长谱法 斜面菌种-----生理盐水洗下细胞------洗涤-----涂布（105个/皿） 纸片1:氨基酸混合液; 纸片2:维生素混合液; 纸片3: 核酸水解液; 纸片4: 酵母水解液 组合营养物法： A 将多种营养因子编组； b. 将组合液的纸片放在涂菌的基本培养基上培养； c. 结果分析； 一组：1 2 3 4 5  二组：2 6 7 8 9 三组：3 7 10 11 12 四组：4 8 11 13 14 五组：5 9 12 14 15 组合营养物法： 组合补充培养基法 如是多个缺陷型菌株， 则制成各营养组合平板，将带测菌株依次点接到这一组平板的对应位置上， 根据在各平板上的生长情况逐个分析各菌株的缺陷型 MM+A +B +C +A+B +A+C 4、 Ames test：对化学诱变剂做检测 原理： his -在基本培养基上不长；而发生回复突变则长。 菌种：鼠伤寒沙门氏菌 his -； 第三节 基因重组和杂交育种 一、原核生物的基因重组 原核生物的基因重组 凡把两个不同性状个体内的遗传基因转移到一起，经过遗传分子间的重新组合，形成新遗传型个体的方式，称为基因重组（gene recombination）或遗传重组。 作用：重组可使生物体在未发生突变的情况下，也能产生新遗传型的个体。 重组与杂交的关系 重组是分子水平上的一个概念，可以理解成是遗传物质分子水平上的杂交 而一般所说的杂交（hybridization）则是细胞水平上的一个概念。 杂交中必然包含着重组，而重组则不限于杂交这一形式。 一、原核微生物的基因重组 特点： 片段性：仅一小段DNA 单向性：共体 受体 转移机制多样性： 转化、 转导、 接合、 原生质体融合 （一）转化 受体菌直接吸收来自供体菌的游离DNA片段，并把它整合到自己的基因组中，而获得部分新的遗传性状的基因转移过程，称为转化。转化后的的受体菌称为转化子（transformant）。 来自供体菌的DNA片段称为转化因子 1、转化发生的条件 （1）两个菌株间的亲缘关系密切 （2）受体细胞要处于感受态. （3）供体DNA片段（转化因子）大小适宜，分子量一般为1× 106 D 左右，15个基因 感受态：受体细胞能从环境吸取外源DNA片段并实现其转化的一种生理状态 （4）单链供体DNA进入受体菌，发生同源重组； （在受体菌表面，一条链被水解） （5）DNA复制，受体细胞分裂，带有新形状的个体为转化子 转染 把噬菌体或其它病毒的DNA（或RNA）抽提出来，让它去感染感受态的宿主细胞，并进而产生正常的噬菌体或病毒的后代，这种现象称为转染（transfection）。 （二）转导（Transduction） 借助缺陷噬菌体为媒介，把供体细胞中DNA片段携带到受体细胞中，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象，称转导。 获得新遗传性状的受体细胞称为转导子（transductant）。转导过程不需要细胞接触，而是以噬菌体为载体 转导主要分为： 完全普遍性转导 普遍性转导 流产普遍性转导