固定化的β-半乳糖苷酶合成低聚半乳糖的分析.pdfVIP

摘 要 B．半乳糖苷酶可以利用乳糖合成低聚半乳糖(COS)，用作功能性食品配料。D一 半乳糖苷酶固定化是工业化处理乳汽使其乳糖合成C,-OS的必要步骤。本论文研究8 ．半乳糖苷酶的固定化方法，以期获得性能良好的固定化酶，将其用于处理乳清合成 GOS。 将乳清粉用蒸馏水溶解复原成一定乳糖浓度的溶液作为实验样品。GOS得率使用 方法。 选择壳聚糖作载体，戊二醛交联的方法固定化13．半乳糖苷酶，研究了固定化的最 适条件：确定出先固化后交联的顺序较好，4℃固定化6h，pH6．0，l％戊二醛室温交 联30min，加酶量为0．4mg／g干重壳聚糖珠，活力回收率达到26．43％，该结果不理想。 实验制备了海藻酸锷一明胶凝胶包埋法固定化酶，其最优条件为：高粘度海藻酸钠 2．54％，明胶0．88％，低粘度海藻酸钠0．24％时，凝胶获得最大的稳定性，重复使用次 数可以达到8次。经过戊二醛交联防止酶泄漏，并目提高了固定化酶的操作稳定性， 加酶量0．06％(w／v)，活力回收率最高可达80％，即固定化酶的比活力为15．1u位凝 胶。海藻酸钙凝胶包埋带恪的固定化酶最适温度为55。C，较游离酶高5C；最适口H 升高0．5个单位，耐热性和pH耐受性变宽，而且具有向碱偏移的趋巍这些特性有利 于固定化酶的直接使用。 利用海藻酸钙一明胶凝胶包埋法固定化酶，以复原乳清为底物合成GOS，经单因素 试验和响应面法(RSA)优化分析，当反应时间为2-0h，乳罐洽量37．4％，温度为58．2 ℃，pH为5．0-6．0，加目每量为0．14％时，COS得率最高，理论值为28．9％，经验证实 验可以达到29．1％。1升的放大实验中GOS得率为28．3％，与小试相差无几。 本论文证实海藻酸钙一明胶凝胶包埋法可以制各活力回收率较高的固定化乳糖 酶，并且具有较好的操作稳定性，该酶可以用于处理高浓度乳清，合成G0s，并具有 进一步扩大试验的价值。 关键词：B-半孚黼酶固定化乳}青粉低聚半乳糖 Abslract can leveloflactose． high galaetooligosacchfides(GOS)at synthesizes p—galactosidase to fulluse in make oflactose 111e was order immobilization investigated off3-galactosidase ofimmobilization was from method studied, wheyindustrially．111cgood ofB-galactosidase thentheimmobdized synthesizeGOS． B-galactosida．sewasappliedto wasreconstitutedtothesolutionwithdeterminedconceatrationoflactose Wheypowder wasadsorbed andcross-linked onchitosan with Aspergillus-oryza-D-galactosid