第八课微生物遗传.docVIP

第章 通过本章的课堂教学，使学生了解微生物生长繁殖的规律，掌握微生物生长的测定方法，及各种物理、化学因素对微生物生长的影响。 二、微生物的群体生长规律 （一）微生物典型生长曲线：延滞期、对数期稳定期恒浊连续培养恒化连续培养SOD学说）、pH 第五节 有害微生物的控制 一、基本概念：抑制、灭菌、消毒、防腐化疗 具体教学过程： 引言 生长是代谢的结果。当同化超过异化，细胞物质量增加，个体重量和体积增大，就是生长。 单细胞的细胞物质增加有限，细胞长大到一定程度就开始分裂繁殖，菌体数量增多，生长多通过繁殖表现出来，以群体细胞数目增加为生长标志。 丝状微生物的生长主要表现为菌丝的伸长和分枝，通常以菌丝的体积和重量增长来衡量生长状况。 生长是一个逐渐发生的量变的过程，是繁殖的基础；繁殖是一个质变的过程，是生长的结果。 第一节 测定生长繁殖的方法 一、测生长量 （一）直接法 1. 测体积： 2. 测干重： 可用离心法或过滤法测定，一般干重为湿重的10%～20%。 （二）间接法 1. 比浊法： 2. 生理指标法 1) 测含氮量； 2) 测含碳量； 3) 其他； 二、计繁殖数 1. 直接计数法（全数）间接计数法（活菌数） （一）细胞周期： 指从一个新细胞的产生到分裂出两个子细胞的全过程。它可简单地分为两个相互延续的时期，即细胞分裂期和分裂间期。分裂间期是细胞增殖的物质准备和积累阶段，分裂期则是细胞增殖的实施过程。 （二）观察微生物个体生长的方法： 1、通过电子显微镜观察细胞的超薄切片： 2、同步培养法技术： 同步生长 synchronous growth：使所有的细胞都能处于同一生长阶段，同时分裂的生长方式。(1)环境条件诱导法： 1）温度调整法：亚适生长温度--最适生长温度培养。2）营养条件调整法：控制浓度或组成，使细胞只能进行一次分裂。3）用稳定期的培养物接种：稳定期细胞处于衰老状态，移入新鲜培养基，可得同步生长抑制DNA合成法DNA合成是细胞分裂前提。抑制一段时间再解除抑制(2)机械筛选法： 它是利用物理方法从不同步的细菌群体中选择出同步的群体，一般可用过滤分离法或梯度离心法来达到 1)选择性过滤法：将不同步的细胞培养物通过孔径大小不同微孔滤器，从而将大小不同的细胞分开，分别将滤液中的细胞取出进行培养，获得同步细胞2)密度梯度离心法：将不同步的细胞培养物悬浮在不被这种细菌利用的糖或葡聚糖的不同梯度溶液里，通过密度一梯度离心将不同细胞分布成不同的细胞带，每一细胞带的细胞大致是处于同一生长期的细胞，分别将它们取出进行培养，就可以获得同步细胞3) 膜洗脱法： 二、微生物的群体生长规律 （一）微生物在分批培养中的生长规律： 微生物置与于一定容积的培养基中，经培养一段时间后，最后一次性地收获，称分批培养。 1. 典型生长曲线 将少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中培养。在适宜条件下，其群体就会有规律地生长，定时取样测定细胞含量，以细胞数目的对数值作纵坐标，以培养时间作横坐标，就可以画出一条有规律的曲线，这就是微生物的典型生长曲线。 2. 典型生长曲线的分期及各分期的意义 根据微生物的生长速率常数（growth?rate?constant），即每小时的分裂代数的不同，一般把典型的生长曲线粗分为延滞期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期。 (1) 延滞期(停滞期、调整期 又叫适应期、缓慢期或调整期，是指把少量微生物接种到新培养液中后，在开始培养的一段时间内，细胞数目不增加的时期。表现：不立即繁殖，生长速率近于0，菌数几乎不变，细胞形态变大。 1) a. 生长速率常数为零； b. 细胞形态变大或增大； c. 细胞内RNA尤其是rRNA含量增高（为分裂作准备），原生质呈嗜碱性。 d. 合成代谢活跃（核糖体、酶类和的合成加快，易产生诱导酶）； e. 对外界不良条件的反应敏感（例如pH、Nacl溶液浓度、温度和抗生素等化学物质）。 2) 形成原因：调整代谢，合成新的酶系和中间代谢产物以适应新环境。3) 消除：增加接种量；采用最适菌龄接种；培养基成分（种子、发酵）4) 实践意义： 延滞期的长短直接影响发酵周期，发酵工业生产中要尽量缩短延滞期，选择对数期接种龄的细胞做种子，增大接种量，使发酵培养基的成分与种子培养基成分接近。 (2) 对数期 log phase 表现：代谢活性最强，几何级数增加，代时最短，生长速率最大1) 特点：此时菌体细胞生长的速率常数R最大，分裂快，细胞每分裂繁殖一次的增代时间（即代时，generation?time）短，细胞进行平衡生长，菌体内酶系活跃，代谢旺盛，菌体数目以几何级数增加，群体的形态与生理特征最一致，抗不良环境的能力强。 2) 重要参数： 在对数期中，以下三个参数尤为重要。 a. 繁殖代数