支气管哮喘、气道重塑及孟鲁司特、地塞米松干预的分析.pdfVIP

支气管哮喘、气道重塑及孟鲁司特、地塞米松干预的研究 中文摘要 背景 支气管哮喘(哮喘)是全球最常见的慢性疾病之一，全世界约有一亿多人罹患支气管 哮喘，对人类的健康构成了很大威胁。 哮喘是气道的慢性炎症性疾病，涉及多种炎性细胞、炎症介质、细胞因子、生长因子、 趋化因子、粘附分子、嗜酸性粒细胞颗粒蛋白等。半胱氨酰白三稀(eysLTs)是哮喘发病过 程中最重要的炎症介质之一，具有众多的生物学活性，通过特异的细胞表面受体发挥作用， cysLTs在哮喘发病过程中的多个环节起作用，cysLTs可诱发气道平滑肌收缩、促进气道高 反应性，促使炎性细胞向气道募集，上调Th2细胞因子、下调Thl细胞因子功能，与细胞 因子相互作用，扩大炎症反应，并可促进气道上皮细胞、平滑肌细胞增殖。 白三烯受体拮抗剂是近年发展起来的一类新型非类固醇抗炎药物，具有显著抑制气道炎 症、细胞因子产生、炎症基因表达，促进炎症细胞调亡，并可减弱哮喘患者气道高反应性等 作用，皮质激素是目前治疗哮喘最有效的药物，通过与胞浆内皮质激素受体结合，发挥广泛 的生物学效应，从临床疗效分析，白三烯受体拮抗剂作用逊色与皮质激素，但长期应用临床 观察，在某些方面与皮质激素产生相似的作用。两种药物如何发挥最大的优势，减少副作用， 控制哮喘症状是摆在我们面前的重要课题。 目的 2 与哮喘炎症、气道重塑的关系及骨髓CD34先祖细胞在肺和骨髓之间的转运。同时为了探讨 p38MAPK在这一过程中可能的机制及白三烯受体拮抗剂孟鲁司特、皮质激素地塞米松对哮 喘炎症、气道重塑的影响。 方法 建立哮喘、气道重塑模型，分别给予孟鲁司特(MK)、地塞米松(DXM)治疗。通过肺 泡灌洗液(BALF)细胞学检查、病理、电镜观察了解气道炎症、气道重塑的改变；采用ELIS 试剂盒监测BALF IL．5、IFN．Y、血清总IgE水平；采用免疫组化方法检测肺组织、骨髓细 胞IL一5及脾脏CD3免疫反应细胞：应用原位杂交和RT—PCR方法检测肺组织 I卜4，IL一5，IL一13，TGF—B2mRNA的表达情况；采用流式细胞仪检测骨髓CD34、CD3阳性 细胞；利用Western blot技术，观察肺组织p38MAPK蛋白表达情况。 结果 哮喘组增加较重塑组明显(pO．01)，Mk、DXM均可显著抑制炎性细胞(p0．01)。 ②与对照组比较，哮喘组BALF 疗使IL一5水平降低，IFN．Y升高(p0．05)。 降低(P0．01)。 髓细胞表达IL一5mRNA密切相关(r=0．78，p0．05)。 ⑤与对照组比较，哮喘组肺组织病理分析显示明显的炎性细胞浸润，以Eos、淋巴细胞为主， 伴气道痉挛、粘液产生增加；重塑组表现为气道上皮细胞增生，平滑肌层增厚，小气道粘液 栓形成等；MK和DXM均有效抑制炎性细胞浸润，气道痉挛，上皮增生及平滑肌增厚等病理 改变。 ⑥与对照组比较，免疫组化显示哮喘组肺组织、骨髓IL一5免疫反应细胞明显增加(PO．01)， 脾脏CD3+细胞亦增加；胍、DXM具有相似的抑制肺、骨髓IL一5免疫反应细胞作用(pO．05)。 ⑦与对照组比较，原位杂交结果表明哮喘组肺组织IL一5，IL一13mRNA表达显著增加 2mRNA表达亦显著 显著(DO．05)；重塑组IL-13mRNA表达较哮喘组明显(p0．05)，TG卜B 2mRNA表达(p0．05)，同时DXM抑制 升高(p0．01)，MK，DXM可有效抑制IL一13，TGF-B IL一13mRNA较MK明显(p0．05)。 ⑧与对照组比较，RT—PCR电泳结果显示哮喘组和重塑组IFN—YmRNA表达较低，而IL一4， IL-5mRNA表达明显下降，并且地塞米松抑制IL．4，IL．5mRNA表达较孟鲁司特更显著。 ⑨与对照组比较，：气道重塑组电镜改变表现为上皮下纤维化，平滑肌细胞增生、肥大，成 纤维细胞生长活跃，上皮细胞、杯状细胞增生，分泌旺盛。应用MK、DXM后，表现为明 显减轻的胶原沉积，气道上皮结构基本完整，未见明显的平滑肌细胞增殖。 ⑨与对照组比较，p38MAPK