冰冻切片神经组织金属锌改良蒂姆NeoTIMM染色试剂盒.doc

冰冻切片神经组织金属锌改良蒂姆（Neo-TIMM）染色试剂盒产品说明书 （中文版） 主要用途 冰冻切片神经组织金属锌改良蒂姆（Neo-TIMM）染色试剂是一种旨在使用技术，分析存档中的组织切片神经含锌神经的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良（）方法、成功实验证明的。主要适用于脑组织安蒙氏角 cornu ammonis或外周神经组织切片海马（hippocampus苔藓纤维区mossy fiber region）和齿状分子层dentate molecular layer）等含锌神经细胞体锥体细胞（pyramidal cells齿状颗粒细胞dentate granule cells）等检测。广泛用于脑神经病理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。 ’s sulfide silver staining）是由蒂姆建立的用于观察脑组织和其它组织中微量金属元素，铜、镍、钴和铁等的染色技术。主要用于观察中枢神经系统中含锌神经元，以及轴突分枝（sprouted axon）轴突苔藓齿状颗粒细胞dentate granule cells其原理在于使用硫化物金属硫化物催化还原离子银为可见金属银沉积，呈现黑色，为金属自显影术（autometallography，AMG）。技术 保存在4℃冰箱里，避免光照；有效保证月 用户自备 实验步骤 样本固着处理 常规麻醉动物℃预冷的PBS由心脏处灌注约5至10分钟，去除血液直至澄清，肝脏显示灰白） 使用适量的℃预冷的 硫化液（Reagent A）灌注处理使用适量的℃预冷的 固着液（Reagent ）灌注处理 即刻小心取出脑组织小心放进毫升液（Reagent ）里℃冰箱里浸泡孵育毫升液（Reagent A）℃冰箱里浸泡孵育 即刻用无菌镊子夹起组织块 用绵纸吸干组织快 即刻进行常规℃冰箱里30%蔗糖脱水过夜和OCT处理后包埋在－20℃条件下进行缓慢冰冻切片，为0微米厚，并铺片在明胶化载玻片上 置于－20℃冰箱里保存 样本染色处理 染色液（Reagent ）染色液（Reagent ）染色液（Reagent ） 取出10片待测的0微米厚的组织切片小心加上微升液（Reagent ）铺满整个切片样品表面小心移去切片上的液（Reagent ）小心加上微升 染色液，铺满整个切片样品表面 ℃温度下孵育0分钟，避免光照 小心移去切片上的 染色液 室温下，小心将切片置入毫升 清理液（Reagent ）中孵育分钟 小心移去切片上的 清理液（Reagent ） （选择步骤）进行复染操作（建议使用 甲苯酚紫（CRESYL VIOLET）复染试剂盒－80052或 中性红复染试剂盒 透明处理 放上盖玻片或封片（中性树脂） 即刻在一般光学显微镜下观察：神经细胞体锥体细胞齿状颗粒细胞，呈现黑色（如果复染――细胞核呈现蓝色，胞浆尼氏（体）物质呈现粉红至紫色）注意事项 本产品为0次操作 操作时，须戴手套 铺片须使用明胶化载玻片，否则染色会掉片 切片建议0至0微米，过厚和过薄不利于检测神经细胞 注意操作安全，尤其使用 建议使用玻璃染色缸 每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干 试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面 整个操作，在避光状态下进行 染色完成后，即刻进行光学显微镜观察 样品染色后保存，避免光照 本公司提供系列神经系统成分染色试剂产品质量标准 本产品经鉴定性能稳定 本产品经鉴定显色清晰 2