淋巴结组织制片中常见问题及对策.docVIP

淋巴结组织制片中常见问题及对策病理常规制片技术是病理诊断的基础。切片质量是指导医师作出准确诊断的重要保证。在制片时，会遇到许多问题，如切片时出现裂痕、皱褶、破碎；染色过深或过浅等。特别是淋巴结组织，由于淋巴结组织细胞成分丰富，间质少，外周有一层较致密的结缔组织被膜【sup】［1］【/sup】，这样的结构特征决定了淋巴组织的常规制片必须遵循“薄切、淡染”的原则。笔者通过摸索和实践，针对淋巴结组织制片时出现这些的常见问题的原因加以分析，总结出了一些经验和体会。 首先对组织切片产生裂隙的原因经行实验分析 材料：本院手术切除的淋巴结样本30例，取材厚度均为0.2～0.3cm，厚薄均匀，采用ZT-12P全自动脱水机进行固定、脱水、透明、浸蜡、包埋机包埋。采用手工染色，主要试剂：Baso苏木素-伊红染液、0.5%盐酸乙醇分化液 方法：将30例样本每个样本分别制成两个蜡块，然后均分为A、B两组；A组30例蜡块常规置于冷台冷却后，按报道【sup】［2］【/sup】直接切片厚度为3μm。B组30例蜡块置于冷台冷却后，将蜡块修到最大面时用拇指捂5～6秒再切片，厚度为3μm。A、B两组切片展片时水温均控制在40℃左右即可，过高小皱褶打不开；过低则切片不平坦、贴片不牢易脱片；最后同时染色 结果：B组切片效果较好、片子完整、结构完好，镜下组织无裂隙、且连片 染色时间的实验分析 将B组每个蜡块分别切3张，然后均分为①②③3组用新鲜苏木素分别进行5、8、10分钟染色，用0.5%盐酸乙醇分化15秒。伊红染色30秒。常规脱水、透明、封固 苏木素染色5分钟的①组染色效果最好，颜色鲜艳，均匀，胞核、胞质清晰，这与报道的一致【sup】［3］【/sup】 讨 论 在淋巴组织疾病的研究中，石蜡切片，HE染色仍是临床病理诊断中最为实用、简便的方法。为了减少或纠正组织切片的裂隙、和解决染色效果不佳的问题，提如下建议 组织处理时，标本取材0.2～0.3cm为宜，厚薄要均匀；最好选用4%中性缓冲甲醛液作为常规组织固定液，并且适当延长固定时间 切片时，拧固刀座，夹紧刀片，防止因机械部分松动而出现切片裂隙，蜡块冷冻后不易立即切片，应将蜡块修到最大面后用拇指捂4～5秒后切片 裱片时水温以40℃左右为宜，以免因水温过高，造成切片扩散，形成人为裂隙 染色时间比常规HE染色、苏木素染色的时间约缩短了一半。大约为5分钟。此时制出的淋巴组织切片平整，结构完好，镜下观察裂隙明显减少或消除，组织细胞核浆对比明显，色彩鲜艳，在高倍镜下可以清晰地观察核膜、核仁和染色质等细微结构。这样能够获得更优良的HE染色切片，从而为临床病理诊断医师做出准确的诊断提供重要保障 参考文献 1 王德田,罗玉凤,曹金伶,等.如何制作精良的淋巴结组织切片［J］.诊断病理学杂志,2005,12（4）:314. 2 康源,刘卫平.淋巴结常规制片技术体会［J］.临床与实验病理学杂志,2008,24（2）:235-236. 3 姜冰,杨军,彭长缨.淋巴结片子染色中苏木精染色时间的探讨［J］.诊断病理学杂志,2010,17（3）:238. 1