中华民国第51届中小学科学展览会组别高中组.PDFVIP

中華民國第 51 屆中小學科學展覽會 作品說明書 科別：生物科 組別：高中組 作品名稱：給我一個『素』解法 —colicin 1b 對牲畜害菌之抑致能力 關鍵詞：colicin 1b、蛋白純化、抑菌圈 編號： 摘要 本實驗主要是希望能利用細菌植株所產生的大腸桿菌素之一：colicin1b（大腸桿菌素 colicin 能抑制並殺死與自己親緣相近的大腸桿菌），來抑制會對家畜例如牛、羊和豬造成疾病 並導致家畜幼體死亡率提高的病菌。我們先分離並製備好 colicin 1b，再分別添加在實際從染 病或因牲畜傳染病而死的牛、羊、豬中體內所分離出 15 株的有害菌株，並培養觀察 colicin 1b 對這些菌株的作用，最終我們測試得知 colicin 1b 對其中 7 株害菌的確達到抑制效果，未來或 許可以發展成生物製劑來取代傳統施用抗生素方式，以降低抗藥性細菌的產生來減低畜牧業 經濟損失。 壹、研究動機： 在一次的校外教學到豬舍的參觀中，我們看到了許許多多的成豬，但卻沒有看到幼豬， 我們詢問了飼主，才得知養豬戶通常會將成豬與幼豬分開飼養；因為出生不到兩星期的小豬 經常因大腸桿菌的影響，造成嚴重的腹瀉而引起營養吸收不良，進而使小豬的死亡率提高， 因此引起我們對大腸桿菌的興趣，於是我們在查詢資料時從一篇國外論文中（Dietary Inclusion of Colicin E1 Is Effective in Preventing Postweaning Diarrhea Caused by F18-Positive Escherichia coli in Pigs，2007）得知有些大腸桿菌會產生大腸桿菌素colicin，來抑制與自己親緣相關的菌種，於 是我們更進一步的去找尋資料時，得知中興大學分生所實驗室有相似的大腸桿菌菌株，可以 產生一種大腸桿菌素：colicin 1b，這種大腸桿菌素的分泌，可能會造成其動物體內體內之菌 相的改變，因此，我們想說是否可以利用這個特性來抑制小豬體內的有害菌叢。 近幾十年來，隨著台灣人口的增長，對肉品的需求量也大幅提高，但是台灣地狹人稠， 因此集約式的高密度養殖方式也就成了考量成本後的必要措施，然而，這種高密度養殖方式 不僅因清理不易而造成牲畜身上的病原菌增加，有時甚至還會造成牲口的大量死亡。多數飼 主為了預防或抵禦這些病菌，常常施加各種大量的抗生素，雖然效果短時間內收效甚著，但 長久下來卻也使得病菌衍生出抗藥性，而使得牲口疾病的治療更加棘手，另一方面，若人類 攝取含高量抗生素的肉品後，也可能導致人體腸胃道健康菌相的失衡。 有鑑於此，我們由中興大學獸醫系取得了由牛豬羊等牲畜體表和體內分離出的 15 株致病 菌，並添加從菌株中萃取出的細菌素 colicin 1b，觀測其對於此 15 株菌的抑制效果，如果 colicin 1b 真能抑制這些病菌，或許未來可以發展取代現行施用抗生素的措施，而達到降低日趨嚴重 的「超級細菌」問題。 貳、研究目的 一、測試大腸桿菌產出細菌素之濃度。 二、測試大腸桿菌產出細菌素之活性。 三、測試 PBS 是否會對 colicin 1b 造成影響。 四、colicin 1b 對牲畜腸內 15 株害菌的抑制效果。   ‐2 ‐ 參、研究設備及器材 一、實驗菌種： PGE80-col1b/pAcyc184-imm DH5α 表一：實驗測試菌種 NO.2 台中乳牛糞 NO.4 善化牛體表 ADDC 豬腸溶血 ADDC 禽類卵黃