溶血栓作用的纳豆激酶基因导入莴苣植株的分析.pdfVIP

溶血栓作用的纳豆激酶·基因导入莴苣檀楝的研究 溶血栓作用的纳豆激酶基因导入莴苣植株的研究 摘 要 本实验采用农杆菌介导法和基因枪介导法，研究了纳豆激酶 i (Nattok nase，简称NK)基因导入可生食的莴苣化actucasativa)的 核基因组和叶绿体基因组，并期望获得转基因莴苣植株．为建立以莴苣 为生物反应器生产可溶解血栓的纳豆激酶，以治疗常见的血栓症。／研究 l 结果如下： 、、 序列825bp，分离出来的纳豆激酶基因与已发表的NK编码序列完全 一致。 (2)将纳豆激酶基因与细胞核载体PBG、PB以及叶绿体表达载体 PLCTB进行定向克隆，经PCR和酶切鉴定都获得了重组子，分别命名为 ll， 型启动子，PB-NK含马铃薯蛋白酶抑制剂II基因的损伤诱导型启动子PI PLCTB—NK含有莴苣启动子与终止子，并在目的基因两侧设有叶绿体同源 片段。 100mg／L，壮观霉素(Sepetinomycin)为20ms／t,时能有效的将转化和非转 化植株筛选出来。 (4)优化了农杆菌介导细胞核表达载体对莴苣的介导条件，确定最 佳的农杆菌侵染浓度为菌体生长对数期的一半、侵染时间为5分钟、预 培养时间为两天、共培养时间也为两天。 谢帆栓作蝌的纳豆激鞠·基因鼎入莴苣械株的研5℃ 苣，纲赡核转鬟：获得了生长庭好的撬性蔫筐檀株，经PCR舄 PBG-NK转化率高于PB-NK。 ∽叶缘体表达载体PLCTB-NK采溺7基嚣检会导法将默导入莴 苣。由于时间有限，而且叶绿体转化植株生长较为缓慢，筛选周期比细 胞核转化长，故实验停留在抗性小苗获得的结采，还没有进行下一步的 检测，具体原医鸯待进一步分辑。上，，p一 ／7 关键词： 纳透激酶基因声 溶血蚴 细胞核转够 转基因苠苣} 叶绿体转化、 2 广西太掌硕士毕魏论文 簿斑捡作梢的纳豆撒酶基目挚入蒿苣槭株的磺宠 INTROl0IUCTlONOF ONTllE STUDIES GENEIN LETTUCE(／,actucasativa) ABSTRACT Inthis medicineNattokinase thrombolytic experiment，apotential was gene introducedinto sativa)with lettuce(Lactuca transformationandbiolisticmethod。The restfltscovered system experiment several 、 followingpoints： was PCRfrom (1)DNAfragment nattokinase