EdU细胞增殖检测使用说明解析.PDFVIP

EdU 细胞增殖检测使用说明 RN: R11053.4 产品简介 EdU （5-Ethynyl-2’- deoxyuridine ）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T ）渗入正在复 制的DNA 分子中，通过基于EdU 与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA 复制活性，适用于细胞增殖、细胞 分化、生长与发育、DNA 修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA 、miRNA、小分子化合物 及其他药物的筛选实验。 与BrdU 检测方法相比，EdU 检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU 与T 非常相似，而EdU 染料只有BrdU 抗体 的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA 变性（酸解、热解、酶解等），可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应， 能在细胞和组织水平更准确地反映DNA 复制活性。 试剂盒内容 Flow In vitro Imaging In vivo 试剂 浓度 Cytometry C10310 C10327 C10313 C10338 C10321 C10322 C10314 EdU 溶液 (试剂A) 1000X 20 μL 100 μL 200 μL 20 μL - - - EdU (试剂A) 粉末 - - - - 2 mg 10 mg 50 mg ® Apollo 反应缓冲液 (试剂B) 20X 500 μL 2.5 mL 5 mL 500 μL 500 μL 500 μL 500 μL ® Apollo 催化剂溶液 (试剂C) 100X 100 μL 500 μL 1 mL 100 μL 100 μL 100 μL 100 μL ® Apollo 荧光染料溶液 (试剂D) 300X 30 μL 150 μL 300 μL 30 μL 30 μL 30 μL 30 μL ® Apollo 缓冲添加剂 (试剂E) 粉末 100 mg 500 mg 1 g 100 mg 100 mg 100 mg 100 mg Hoechst 33342 (试剂F) 100X 150 μL 750 μL 1.5 mL 150 μL 150 μL 150 μL 150 μL 运输与保存 室温运输，4˚C 储存，勿冻存，荧光试剂请避光保存，可稳定储存一年。 使用前须知 贴壁细胞宜采用荧光检测方式，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜、高内涵筛选仪检测，亦可进行爬片检测。 悬浮细胞可用涂片方式荧光检测，亦可采用流式细胞仪分析，但流式细胞仪需要具备相应荧光通道(表4) 。 实验准备 • 1X PBS (pH 7.2~7.6) • 渗透剂(含0.5% Triton X-100 的PBS) • 甘氨酸溶液(2 mg/mL) （去离子水配置） • 细胞固定液(即含4% 多聚甲醛的PBS) • 96/24/12/6 孔培养板或培养皿 注意：请使用一次性手套，废液请妥善处理。 实验参考 表1 EdU 培养基及染色反应液的使用量参考