蛋白质的化学3.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * 第一向电泳：等电聚焦电泳 聚焦后凝胶放置在SDS凝胶上，进行第二向电泳 第二向电泳：SDS分子量大 分子量小 pH9 pH3 pH9 pH3 大肠杆菌全蛋白提取液双向电泳凝胶染色后照片 利用离子交换基质上的可解离活性基团对各种蛋白结合力不同而达到分离目的的一种分离方法 常用的支持基质：纤维素，琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶、树脂 ——CH2COO- H+ ——DEAE+ Cl- 活性基团： 阳离子：羧甲基（CM） 阴离子：二乙基氨基乙基（DEAE） 由于蛋白质分子具有两性性质，所以可用阳离子交换剂，也可用阴离子交换剂进行蛋白的分离纯化。 离子交换层析 阴离子交换层析分离蛋白质 阳离子交换层析原理 洗脱方法：改变盐浓度和改变pH的方法 亲和层析(affinity chromatography) 利用生物分子与配基之间所具有的专一而又可逆的亲和力，使生物分子分离纯化的技术。这种分离纯化方法专一性强，理论上可以从复杂的体系中一步提取所需的物质。 免疫亲和层析：抗原—抗体 凝集素亲和层析：糖—凝集素 金属螯和层析：如NTA-Ni—poly-His 根据配基特异性的分离纯化方法 氨基酸、多肽、蛋白质类生物药物 (一)氨基酸及其衍生物 1.AA营养价值及其与疾病治疗关系 ①八种必需氨基酸： 是人体必需从食物中获取的营养物 ②胱氨酸、酪氨酸为非必需AA，但由蛋氨酸、苯丙氨酸产生 所以食物中若有足够的胱氨酸和Tyr，可以减少对Met和Phe的需求量，故胱氨酸和Tyr也称为半必需氨基酸。 ③Lys对婴幼儿来说具有特殊的重要意义 赖氨酸的需求量，按每天每kg体重计算，成年人为12mg，1岁以下婴幼儿为103mg。 谷氨酸 谷氨酰胺 乙酰谷酰胺铝 组胺酸盐酸盐 ? 甘氨酸及其铝盐 谷氨酸盐酸盐 ? 通过调节胃液酸碱度，实现治疗作用 通过保护消化道粘膜或促进粘膜增生而防治胃及十二指肠溃疡 2.治疗消化道疾病的氨基酸 精氨酸盐酸盐 磷葡精氨酸 鸟天氨酸 谷氨酸钠 瓜氨酸 赖氨酸盐酸盐 天冬氨酸 3.治疗肝病的氨基酸及其衍生物 支链氨基酸 4.治疗脑及神经系统疾病的氨基酸及其衍生物 谷氨酸钙盐及镁盐 ——维持神经肌肉正常兴奋，治疗神经衰弱 氢溴酸，谷氨酸钠 官能症 γ—酪氨酸 —— 中枢神经系统的抑制性递质，治疗记忆、 色氨酸 语言障碍、脑外伤后遗症 5—羟色氨酸 酪氨酸亚硫酸盐 ——治疗脊髓灰质炎、结核性脑膜炎 偶氮丝氨酸——治疗白血病 氯苯丙氨酸——治疗癌症综合症 磷乙天冬氨酸——治疗B16黑色素瘤及Lewis肺癌 ? 氨基酸药物中治疗作用比较显著的多数是其衍生物。 5.用于肿瘤治疗的氨基酸及其衍生物 （二）多肽类药物 1.多肽激素： 促皮质素（ACTH） 促黑激素（MSH） 垂体多肽激素 脂肪水解激素（LPH） 催产素（OT） 加压素（AVP） ? 促甲状腺激素释放激素（TRH） 下丘脑激素 生长素抑制激素（GRIF） 促性腺激素释放激素（LHRH） ? 甲状腺激素 甲状旁腺激素（PTH） 降钙素（CT） 胰岛激素 胰高血糖素（不包括胰岛素，因为胰岛素是蛋白） 胰解痉多肽 ? 胃泌素 胆囊收缩素—促胰酶素（CCK—PZ） 肠泌素 胃肠道激素 肠血管活性肽 抑胃肽(GIP)