气相色谱高效液相色谱毛细管电泳.pdf

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气相色谱高效液相色谱毛细管电泳

色 谱 气相色谱 高效液相色谱 毛细管电泳 色谱法  色谱法:根据各物质在流动相与固定相中分配 系数(溶解 或 吸附的能力)的不同而进行分 离、分析的方法。  各组分被分离后,可进一步进行定性和定量分 析 展开板 展开槽 b a3 a2 a1 Rf1 a1 b 展开板 色谱分离 慢 中等 淋洗液 快 Temporal course 色谱分类-按两相的物理状态分类  气相色谱法 (gas chromatography 简称 GC)  液相色谱法 (liquid chromatography 简称 LC)  超临界流体色谱法 (Supercritical Fluid Chromatography 简称 SFC ) 气相色谱  气相色谱法的分离原理是利用要分 离的诸组分在流动相(载气)和固 定相两相间的分配有差异(即有不 同的分配系数),当两相作相对运 动时,这些组分在两相间的分配反 复进行,从几千次到数百万次,即 使组分的分配系数只有微小的差异, 随着流动相的移动可以有明显的差 距,最后使这些组分得到分离。 液相色谱-分类  吸附色谱法 ( adsorption chromatography ):  分配色谱法 ( partition chromatography ): 根据不同组分在固定相中的溶解能力和在两相间分配系 数的差异进行分离的方法。  离子交换色谱法 (ion exchange chromatography ):  排阻色谱法 ( size exclusion chromatography ):  亲合色谱法 ( affinity chromatography ) 分配色谱法-键合相色谱  键合相固定相:在硅胶的表明用键合反应 把官能基团键合到表面上,解决固定相流 失的问题。  液相色谱 正相色谱:流动相极性比固定相极性小 反相色谱:流动相极性比固定相极性大 毛细管电泳  在电解质溶液中,位于电场中的带电离子 在电场力的作用下,以不同的速度向其所 带电荷相反的电极方向迁移的现象,称之 为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的 不同,迁移速率不同而实现分离。 毛细管电泳-分类  毛细管区带电泳(CZE) 最普遍、最基本的一种分离模式。  毛细管凝胶电泳(CGE) 将聚丙烯酰胺在毛细管柱内交联生成凝胶。其具有多孔性,类 似分子筛的作用,试样分子按大小分离。能够有效减小组分扩散, 所得峰型尖锐,分离效率高。可分离测定蛋白质、DNA等。  毛细管胶束电动色谱(MECC) 在缓冲溶液中加入离子型表面活性剂,形成一疏

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