植物组织培养教程 李浚明2 2.pptVIP

（五）琼脂： 琼脂作为固化剂用于组织培养中，起支持植物的作用，不提供营养，为海藻中提取的一种高分子化合物，仅溶于热水（90 oC以上），成为凝胶，冷却后（40 oC以下）即凝固为凝胶。 琼脂的用量通常在4～10g/L. 琼脂是组织培养培养基中主要的成本支出，约占80％。 琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工工艺有关外，还受高压灭菌时的温度、时间以及pH影响。 （六）有机附加物： 1、椰子汁： 用量为100～200g/L。 2、香蕉泥： 使用量为150～200g/L。 3、苹果汁、番茄汁等。 （七）其他成分： 1、活性炭： 使用量为0 .2-1%。 2、抗生素： 常用青霉素、链霉素、庆大霉素等，用量在5～20mg/L。 3、抑制酚类物质形成的物质： （1）抗坏血酸： 可以加入培养基或浸泡处理外植体。 （2）聚乙烯吡咯烷酮（PVP）： 加入培养基中。 4、生长抑制剂： 常用矮壮素、比久（B9）、多效唑（pp333） 、三碘苯甲酸、根皮酚等。 二、培养基的类型： 1、高盐浓度培养基：MS、B5、SH等。 适用于多数营养需求量较大的植物。 2、中等盐浓度培养基：Nitsh、Miller等 大量元素浓度约为MS的1/2。 3、低盐培养基：WPM、 White等。 大量元素浓度约为MS的1/4左右。 适用于木本植物的培养。 表1　MS培养基的组成配方 组成成分 数量(mg/l) 组成成分 数量(mg/l) NH4NO3 1650 Na2-EDTA 37.3 KNO3 1900 FeSO4·7H2O 27.8 CaCl2·2H2O 440 CuSO4·5H2O 0.025 MgSO4·7H2O 370 蔗糖 30 KH2PO4 170 pH 5.8 KI 0.83 肌醇 100.0 H3BO3 6.2 烟酸 0.5 MnSO4·4H2O 22.3 盐酸吡哆醇 0.5 ZnSO4·7H2O 8.6 甘氨酸 2.0 Na2MoO4·2H2O 0.25 盐酸硫铵等 0.4 CoCl2·6H2O 0.025 表2　B5培养基的组成和配方 组成成分 数量(mg/l） 组成成分 数量(mg/l) KNO3 2500 FeSO4·7H2O 27.8 CaCl2·2H2O 150 CuSO4·5H2O 0.025 MgSO4·7H2O 250 蔗糖 40 (NH4)2SO4 134 pH 5.5 KI 0.75 肌醇 100 H3BO4 3.0 烟酸 1.0 MnSO4·4H2O 10 盐酸吡哆醇 1.0 ZnSO4·7H2O 2.0 激动素 0.1 Na2MoO4·2H2O 0.25 2,4－D 0.1－1.0 CoCl2·6H2O 0.025 盐酸硫铵 10 Na2-EDTA 37.3 　　　　　　　 　 　　表3 N6培养基的组成和配方 组成成分 数量(mg/l) 组成成分 (mg/l) KNO3 2.3 Na2－EDTA 37.3 CaCl2·2H2O 166 FeSO4·7H2O 27.8 MgSO4·7H2O 185 蔗糖 50 KH2PO4 400 pH 5.8 (NH4)2SO4 463 烟酸 0.5 KI 0.8 盐酸吡哆醇 0.5 H3BO3 1.6 甘氨酸 2.0 MnSO4·4H2O 4.4 盐酸硫铵 1.0 ZnSO4·7H2O 1.5 * 第二节 培养基的组成、配制与灭菌 一、培养基的组成和作用 培养基（medium）是植物组织培养的重要材料，是外植体生长的营养物质，只有配制出适宜的培养基，才能使组织培养获得成功。 通常植物组织培养所用培养基包括以下六大类成分，即矿质营养、有机成分、植物生长调节剂、碳源、琼脂以及其他附加物等。 培养基的主要指标是营养成分及植物生长调节物质的浓度。 （一）矿质营养： 矿质营养又称无机营养，是指植物生长发育所需要的各种化学元素。 矿质元素的生理作用： （1）组成各种化合物，成为结构物质； （2）构成特殊物质，参与代谢； （3）维持离子平衡、胶体稳定及电荷平衡等电化学作用； （4）