HPLC培训题库.pptVIP

七、高效液相色谱分离模式 基于极性的分离 考虑到流动相和固定相的极性，对于某一固定相，必须选择一个流动相，使得感兴趣的分析物可以结合在色谱柱上，但不能太强而洗脱不下来。在具有类似极性强度的溶剂中，考虑固定相和流动相的配合，可以区分分析物极性和溶解性的更微弱的差别，使色谱系统的选择性最大化。总而言之，色谱学家会选择最佳的具有合适相反相极性的流动相和固定相的组合。之后，当样品流过色谱柱的时候，同性相吸的原则将决定哪一种分析物流速放缓（出峰慢），哪一种流速更快（出峰快）。 七、高效液相色谱分离模式 基于极性的分离 正相高效液相色谱 图 S -1 代表三个染料混合物的正相色谱分离。极性的固定相最强地保留了极性的黄色染料。相对非极性的蓝色染料在非极性溶剂的流动相保留竞争中胜出，很快被洗脱出来。由于蓝色染料最像流动相[两者都是非极性]，它流动得更快。对硅胶柱正相色谱来说，典型的情况流动相是100% 极性较小的有机相，不含水。 样品是极性小的先出峰 图 S -1: 正相色谱法 七、高效液相色谱分离模式 基于极性的分离 反相高效液相色谱（最常用） 反相是指与正相恰好相反的色谱模式，即使用极性流动相和非极性[疏水性如C18]固定相。图 S-2 描述了三种染料的黑色混合物被该种方法分离的过程。 样品是极性大的先出峰 图 S -1: 反相色谱法 七、高效液相色谱分离模