使用化学成分界定细胞培养基在WAVE波浪生物反应.PDF

GE Healthcare Life Sciences 使用化学成分界定细胞培养基 在WAVE波浪生物反应器中进行CHO 细胞培养的工艺开发和快速临床生产 Harrison Han, Zhili Yao, Yueqi Gong, Mike Chen, ACRObiosystems Co. Ltd, Beij ing 康平, 产品专家, GE Healthcare Life Sciences, China 介绍 材料与方法 在FDA新批准的抗体新药中，绝大部分是以CHO细胞 •化学成分界定培养基: 的大规模培养为基础进行生产的。在整个细胞培养工 •C D ProC HO (A C RO biosy st e ms 细胞工艺组开发) , 艺中，培养基和反应器系统是非常重要的两个环节。 CDM4CHO, CD-CHO为市售产品 化学成分界定的培养基在细胞培养工艺中，使培养基 •补料液：CDFd1,CDFd2,CDFd3,CDFd4,CDFd5(ACRObi 的开发和优化工作更明确，后续生产工艺更稳定，下 osystems细胞工艺组开发) 游纯化更简化和有针对性，从而保证产品质量和安全 •Golden-TransT M, ACRObiosystems 开发 性。 •2L和20L细胞培养袋，WAVE 20/50生物反应器 新型WAV E生物反应器，波浪式混合方式操作简单、 •10L 传统搅拌罐 易于放大，无菌无热原细胞培养袋降低污染风险，提 •CHO-S细胞 （客户提供） 高工艺开发和生产成功率；较低的前期投入，使用过 •全程无动物源性无血清化学成分界定稳定细胞系开 程中免除了大部分清洁和灭菌验证成本，显著缩短产 发(ExpressCloneT M Technology) 品开发的时间，增加产能。 •整合式细胞系筛选，培养基/工艺优化策略 本研究使用化学成分界定的培养基进行培养工艺开发 •人源化单克隆抗体138株 以提高CHO细胞生长表现，使用10L WAVE生物反应器 •接种密度：0.3X106 cells/mL 进行fed-batch流加培养，达到1.8-2.0X 107cells/ mL的 •流加补料策略 活细胞密度和3.0g/ L以上的抗体产量，在53天内成功 •Elisa及HPLC分析抗体产量 生产100g单克隆抗体，显著缩短生产周期。 •抗体质量分析方法参照”人用单克隆抗体质量控制 技术指导原则”(SFDA) 应用实例 CHO细胞培养的工艺开发和快速临床生产 关注点 试剂(Golden-T ransT M)悬浮转染生长于化学成分界定培 养基 （formula 11）CHO-S细胞。采用快速克隆平台 •稳定系细胞系开发中整合开发策略及无动物源无血 技术 （ExpressCloneT M ）构建和筛选全流程均为无血 清化学成分界定培养基的应用； 清无动物源性过程，与传统的构建与筛选相比节约了 •市售培养基和CD ProCHO培养基在开发和优化CHO