秸秆污泥堆肥产纤维素酶细菌的筛选及产酶条件优化 - 生态与农村环境 .pdf

－ 生态与农村环境学报　 ２０１３， ２９ （６）： ７６８ ７７２ 　 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｃｏｌｏｇｙ ａｎｄＲｕｒａｌ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ 秸秆污泥堆肥产纤维素酶细菌的筛选及产酶条件优化 ① 佘婷婷， 葛　 骁， 李买军， 张盛华， 禇艳春， 郭海宁， 王小治 ， 封　 克　 （扬州大学环境科学与工程学院， 江 苏 扬州　 ２２５１２７） 摘要： 从添加秸秆进行堆肥处理的污泥中采集样品，通过富集培养和刚果红平板染色法筛选分离出具有纤维素 降解能力的细菌，再通过酶活力测定从中分离筛选出１株相对高活性的产纤维素酶细菌Ｃ１；通过基于 １６Ｓ ｒＲＮＡ 基因序列的系统发育分析，初步确定该菌株为Ｄｅｖｏｓｉａ ｓｐ．。 利用单因素试验对目的菌株Ｃ１进行产纤维素酶发酵 条件优化，结果表明菌株Ｃ１产纤维素酶的最佳发酵时间、培养温度、摇床转速以及最适初始ｐＨ值分别为６０ ｈ、 －１ ３０ ℃、１３０ｒ ·ｍｉｎ 和７２～７５，且在该条件下其滤纸酶（ＦＰａｓｅ）和羧甲基纤维素酶（ＣＭＣａｓｅ）活力分别达２３１０和 －１ ５４９７ Ｕ ·ｍＬ 。 关键词： 纤维素降解； 筛选； 酶活力； 条件优化； 鉴定 － － － 中图分类号： Ｘ１７２； Ｘ７０５　 　 文献标志码： Ａ　 　 文章编号： １６７３ ４８３１（２０１３）０６ ０７６８ ０５ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ Ｓｔｒａｉｎｓｏｆ Ｃｅｌｌｕｌａｓｅ⁃ＰｒｏｄｕｃｉｎｇＢａｃｔｅｒｉａｉｎ Ｃｏｍｐｏｓｔｏｆ ＳｅｗａｇｅＳｌｕｄｇｅａｎｄＳｔｒａｗａｎｄＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆ Ｃｅｌｌｕｌａｓｅ⁃Ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．ＳＨＥ Ｔｉｎｇ⁃ｔｉｎｇ，ＧＥＸｉａｏ，ＬＩＭａｉ⁃ｊｕｎ，ＺＨＡＮＧＳｈｅｎｇ⁃ｈｕａ，ＣＨＵＹａｎ⁃ｃｈｕｎ，ＧＵＯＨａｉ⁃ ｎｉｎｇ，ＷＡＮＧ Ｘｉａｏ⁃ｚｈｉ，ＦＥＮＧ Ｋｅ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ ２２５１２７，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｓａｍｐｌｅｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄｆｒｏｍ ｃｏｍｐｏｓｔ ｏｆ ｓｌｕｄｇｅ ａｎｄ ｓｔｒａｗ ｗｅｒｅ ｉｎｃｕｂａｔｅｄｆｏｒ ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ ｃｕｌｔｕｒｅ，ａｎｄｔｈｅｎ ｓｔｒａｉｎｓｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａ ｃａｐａｂｌｅ ｏｆ ｄｅｃｏｍｐｏｓｉｎｇｃｅｌｌｕｌｏｓｅｗｅｒｅｓｃｒｅｅｎｅｄｏｕｔｗｉｔｈｔｈｅＣｏｎｇｏｒｅｄｓｔａｉｎｉｎｇｐｌａｔｅｍｅｔｈｏｄ．Ｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆ ｔｈｅ ｓｔａｉｎｓ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ａｎｄ ｏｎｅ ｓｔｒａｉｎ，ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎ ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ⁃ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｗａｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ａｓ Ｃ１． Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ １６Ｓ ｒＲＮＡｇｅｎｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔｔｈｅｉｓｏｌａｔｅｄｓｔｒａｉｎｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａ，Ｃ１，ｗａｓｐｒｅｌｉｍｉｎａ⁃ ｒｉｌｙ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｓＤｅｖｏｓｉａ ｓｐ． Ｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｗｅｒｅａｄｏｐｔｅｄｔｏｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｆｏｒ Ｃ１． Ｒｅｓｕｌｔｓ － ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ｆｏｒ Ｃ１，６