ⅱ型糖尿病大鼠神经视网膜组织中差异蛋白质分析 - 分析化学.pdf

38 (FENXI HUAXUE) 10 第 卷 分析化学 研究报告 第 期 2010 10 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1462 ～ 1468 年 月 DOI :10． 3724 / SP． J． 1096． 2010． 01462 Ⅱ型糖尿病大鼠神经视网膜组织中差异蛋白质分析 * 1 1 1 2 王亚冬 童明庆 崔毓贵 张民英 2 2 3 2 郭雪江 王玲 许志洋 王富强 1 ( ， 210029) 2 ( ， 210029) 南京医科大学第一附属医院 南京 南京医科大学基础医学院 南京 (Streptozotocin ，STZ ) II (T2DM) 摘 要 以高脂饮食联合小剂量链脲菌素 注射方法诱导大鼠 型糖尿病 模 ， 。 型为研究对象 采用比较蛋白质组学技术鉴定和分析早期糖尿病神经视网膜差异表达蛋白 通过联用液氮 、 、 ， 900 g 。 内研磨 冰浴超声 高速离心提取全蛋白技术 提取每只大鼠神经视网膜全蛋白质总量约 μ 采用双向 (2-DE) ， 2500 。 凝胶电泳 分离技术 获得 个以上可辩认的蛋白质斑点 通过蛋白质组学比对技术筛选出糖尿病 ， (MALDI-TOF- MS / MS) 状态下神经视网膜差异表达蛋白 用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱 和肽 (PMF) 20 。 Gene Ontology (GO) ， ， 质量指纹图谱 鉴定出 个差异蛋白点 按照 分类体系 对差异蛋白归类分析 。 Pathway Studio ， 揭示其亚细胞定位和分子功能 应用 软件对差异表达蛋白的生物学意义进行分析 认为凋亡 是早期糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopathy ，DR)重要的细胞事件;AnnexinΙ 、CRYAB 、mtHsp70 蛋白是与病 ， DR 。 理过程相关的关键蛋白 对研究 致病机制有重要意义 ; ; ; ; 关键词 大鼠神经视网膜 比较蛋白质组学 双向凝胶电泳 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 糖尿病 1 引 言 糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopathy ，DR)是不