长白山药用真菌树舌凝集素的纯化及生化特性.pdfVIP

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2017-09-02 发布于天津
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长白山药用真菌树舌凝集素的纯化及生化特性.pdf

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长白山药用真菌树舌凝集素的纯化及生化特性

China Biotechnology, 2005, 25( 9): 84~ 88 * ** 张春玉黄国辉林景卫孙非许守民刘立侠 ( 130024) 用硫酸铵分级沉淀离子交换和HPLC层析等方法, 从长白山药用真菌树舌的菌丝体中分离化了一种凝集素(Ganoderm a app lanatum lectin,简称 G L), SDSP GE检测其为单一蛋白条带经过 SDS- P GE测得其亚基分子量为 15kDa左右, HPLC分析分子量为 58kDa 左右, 表明 G L由4 个亚基组成氨基酸组成分析表明, G L 中甘氨酸含量较高, 不含蛋氨酸和色氨酸, 中性糖含量约 11. 2%圆二色 CD谱显示其含有 3. 6% 的螺旋46. 8%的转角和 49. 6%无规则卷曲, 不含有折叠G L可以凝集供试的 2种动物血和 3种血型人血的血红细胞,但对不同来源的血红细胞凝集滴度不同糖抑制实验表明, 只有棉籽糖和 D- 松三糖部分抑制 G L的凝血 2+ 2+ 2+ 活性G L具有较好的热稳定性且其凝血活性不受 Ca Mg 和 Zn 等二价阳离子的影响树舌凝集素生化特性血凝集活性 ( Lectin) 1 , [ 1] 1. 1 , ; 50, 12~ [ 2] ; 190kDa, 0% ~ 18% , , 2% , DE E Sephadex 25 Pharmacia; (Ganoderm a Cap ense ) (F lamm u lina velu tip es ) Tris( SDS) ( A grocy be aeg er ita ) ( T r icholom a ; m ongolicum ) ; [ 3~ 6] , Sigma; 1. 2 , 1. 2. 1 凝集素的分离纯化 60g(), 10mmol/L TrisHCl (pH8. 0) 24h, , , , , 3500r/min 20m in, , 40%, 20m in 4 4 000r/m in 30m in