抗cd5 单链抗体的基因构建、蛋白纯化及活性鉴定.pdfVIP

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2017-09-02 发布于天津
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抗cd5 单链抗体的基因构建、蛋白纯化及活性鉴定.pdf

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抗cd5 单链抗体的基因构建、蛋白纯化及活性鉴定

Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 2011 32 4 26 1 中国生化药物杂志年第卷第期 CD5 、抗单链抗体的基因构建蛋白纯化及活性鉴定，，，林晓思许健王生育颜江华 ( ， 361000) 厦门大学医学院抗癌研究中心福建厦门 : CD5 (scFv anti-CD5) ， CD5 摘要目的构建高表达的抗单链抗体工程菌为开展以抗单链抗体为构件的肿瘤。 Genbank CD5 H65 (VH) (VL) 免疫治疗研究奠定基础方法从中获得抗单克隆抗体的重链可变区和轻链可变区，， PCR ， pET22b (+ ) 。的基因序列用连接肽的编码序列连接用重叠技术获得目的基因酶切后插入构成重组质粒 E． coli BL21 (DE3) ， Ni-NTA ， Western blot- 测序正确的重组质粒转入诱导表达产物经柱纯化后复性流式细胞术和 ting 。，， CD5 。检测活性结果获得序列正确的重组质粒工程菌表达量高产物复性后具有识别抗原的活性结论 scFv anti-CD5 ， scFv anti-CD5 。成功构建了高表达的工程菌为的应用奠定了基础 :CD5 ; ; ; 关键词单链抗体基因表达中图分类号:Q78 文献标识码:A 文章编号:1005-1678 (2011)04-0261-04 Gene construction ，protein purification and activity evaluation of scFv anti-CD5 LIN Xiao-si ，XU Jian ，WANG Sheng-yu ，YAN Jiang-hua (Cancer Research Center ，Xiamen University ，Xiamen 361000 ，China) Abstract :Purpose To construct a genetic engineering E． coli strain with high expression level of scFv