采用Empower样品组生成器自动创建色谱方法进行方法验证 - Waters.PDF

技术简报 采用Empower样品组生成器 自动创建色谱方法进行方法验证 Margaret Maziarz, Mark Wrona, Paul Rainville, Jade Byrd, Mia Summers和Diane Diehl 目的 Empower 3样品组生成器通过定义测试所需变量的 ® 展示采用Empower 3软件的样品组生成器 自动创建色谱方法和样品组方法，并将 范围，简化了仪器方法、方法组和样品组方法的 其用于验证盐酸甲氧氯普胺及其有关物 创建过程。 质的UPLC® 方法。 背景 分析方法的验证过程非常复杂且要求严 苛，包含许多费时的步骤。一些验证步 骤涉及数据的采集、审查和处理，以及 验证结果的计算、批准和最终报告。其 中的一项关键任务是稳定性测试，该测 试研究色谱参数中的细微改变对方法性 能的影响，从而确定耐受限值。为了进 行每个验证测试的数据采集，必须精心 设计和创建多个色谱方法。然而，手动 设计、创建和验证这类方法过程繁琐且 容易出错。 Empower 3样品组生成器通过定义测试所 需变量的范围，简化了仪器方法、方法 图1. 加载到Empower 3样品组生成器中的稳定性测试试验设计(DoE)，来自Empower 3 MVM 组和样品组方法的创建过程。通过将这 方案。 些任务自动化，简化了色谱方法和样品 序列的生成，同时避免了抄录错误。由 在本文中，我们展示了如何利用Empower 3样品组生成器自动创建色谱 于最大限度简化了繁琐的任务，实验室 方法应用于验证盐酸甲氧氯普胺及其USP指定有关物质的UPLC方法稳定 效率和工作效率均获得了提升。 性测试。 技术简报 解决方案 采用Empower 3软件的方法验证管理器(MVM)验证了盐酸甲氧氯普胺及其USP指定有关物质的UPLC 1 方法 。MVM软件简化了一个应用中从创建验证方法到数据采集、审查、分析、批准和报告验 证数据的整个验证过程。 Empower 3样品组生成器被用于简化创建色谱方法时所必需的稳定性测试。针对稳定性，评估 以下参数： ■ 柱温：45 ± 2.0 °C ■ 流速：0.6 ± 0.05 mL/min ■ 波长：270 ± 2 nm 在Empower 3 MVM项目中，我们打开样品组生成器并加载了如图1所示的稳定性验证测试。 MVM试验设计，将8种不同仪器条件导入到了Empower 3样品组生成器中。 接着，在样品组生成器中通过以下步骤创建仪器方法、方法组和样品组方法以运行稳定性 试验： 1.将柱温、流速和检测波长因子设定所需值 2.为梯度分离设定所需参数 3.设定空白/标准溶液和平衡时间的要求 4.生成样品组方法 采用Empower 3样品组生成器，我们能在不同色谱条件下自动创建仪器方法、方法组和样品 组方法，用于稳定性研究。稳定性测试的样品组方法(如图2所示)是根据稳定性验证测试的 实验计划设计，对每次运行的空白/标准溶液进样、实验名称和方法组进行了设置。当仪器 条件(如流速或柱温)改变时，则在样品列之间添加平衡步骤。这些仪器方法都将自动创建 到方法组中。 图2.采用Empower 3样品组 生成器生成的稳定性测试 的样品组方法。 技术简报 这种自动化的生成步骤让我们能够快速开始色谱运行，并且对创建的所有方法的正确性 充满信心。此外，与手动过程相比，创建色谱方法所需的时间缩短了约95% 。图3为稳定 性测试采集的色谱数据。. 0.04 0.04 U 0.02