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第三代反义核酸技术——肽核酸

维普资讯 第 22卷 第 4期 川I 北 医 学 院 学 报 Vo1.22.No.4 2007年 8月 JOURNALOFNORTH SICHUAN MEDICALCOLLEGE Aug·2007 309 第三代反义核酸技术一肽核酸 谢 勇恩 (川北医学院免疫与分子生物学研究室,四川 南充 637007) 摘 要:肽核酸是一种人工合成的DNA分子的类似物,被称之为第三代反义核酸 ,是 目前反义核酸技术领域研究的前沿和热 点。本文简要叙述了肽核酸的分子结构、理化性质和杂交特性以及肽核酸在基因表达调控、分子生物学实验研究和疾病基因 治疗研究等方面的应用情况。 关键词:肽核酸;基因表达调控 ;基因治疗 文章编号 :1005-3697(2007)04-0309-05 中图分类号:R34 文献标识码 :A 肽核酸 (peptidenucleicacid,PNA)是继硫代磷 PNA骨架结构呈电中性 ,当其与互补的靶核酸序列 酸酯寡核苷酸 (第一代反义核酸)、杂合型反义核酸 杂交时不受静电排斥作用 的影响 ,所形成 的 PNA— (第二代反义核酸)之后 的第三代反义核酸。由于 DNA或 PNA-RNA杂交分子比天然的同源或异源杂 其独特的理化性质、杂交特性 以及对基 因转录和翻 交分子具有更高的稳定性。实验证明,PNA-DNA杂 译 的调控作用 ,在分子生物学研究、肿瘤和传染性疾 交体的解链温度 (Tm值)比相应 的DNA-DNA杂交 病基因治疗等方面均显示 出较为广阔的应用前景。 体的解链温度高 。(2)PNA的另一杂交特性是杂 交活性几乎不受介质盐浓度的影响,在低盐离子强 1 PNA的分子结构 度和没有镁离子的条件下 ,PNA都能与靶序列 DNA PNA是由丹麦科学家 Nielsen于 1991年首先合 或 RNA分子形成稳定的杂交体,由于 DNA或 RNA 成的,其经典 的分子结构是 由重复性 的N.(2.氨基 分子 的二级结构在很大程度上依赖于介质 的离子强 乙基)甘氨酸单元通过酰胺键相连取代 DNA分子 度 ,在低盐浓度条件下,PNA与靶序列 DNA或 RNA 中的磷酸二酯键骨架所形成 的一种 DNA分子的类 杂交还有利于消除二级结构对杂交效率 的影响 。 似物 ,其嘌呤和嘧啶碱基则通过亚甲基羰基连接在 (3)PNA 以序列特异性 的方式与互补 的 DNA 或 甘氨酸的氮原子上…。 RNA分子杂交 ,严格遵循 Watson-Crick碱基互补配 对原则 ,与 DNA分子不同的是 :PNA既可 以采取反 2 PNA的理化性质和杂交特性 向平行互补结合方式,也可 以采取正向平行互补结 PNA非天然的骨架结构使其兼具多肽和核酸 合方式与其靶序列杂交 ,但以反 向平行互补结合方 的某些理化性质 ,但又与多肽和核酸分子有着一定 式为主 。(4)PNA-DNA杂交比DNA.DNA杂交更 的差异。PNA人工合成的多聚酰胺骨架结构几乎 易受碱基错配的影响,PNA-DNA碱基错配杂交体分 不带电荷,而DNA和 RNA分子 由于其骨架结构 中 子的不稳定性 比DNA-DNA碱基错配杂交体分子的 有极性较强的多糖和磷酸分子而带较多的负电荷。 不稳定性高。有研究表明:在 PNA与 DNA分子杂 PNA分子可以有效抵抗核酸酶和蛋 白酶的降解 ,显 交 时,若每 15个碱基对 中有一个碱基对错配 ,则可 示 出高度的生物稳定性 ,即使把 PNA分子与 s1核 使所形成的杂交分子的Tm值降低约 15℃,而对于 酸酶或 DNA酶 I共同孵育,也不至于产

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