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《dna和蛋白质技术》课件ppt版
专题5DNA和蛋白质技术 课题1 DNA的粗提取与鉴定 课题目标: 尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取; 了解DNA的理化性质,理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。 课题重点 DNA的粗提取和鉴定方法。 * DNA的粗提取与鉴定 多聚酶链式反应扩增DNA片段 血红蛋白的提取与分离 本节问题: 1、DNA的粗提取和鉴定根据的原理是什么? 1)DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而不同。具体见P54图5-1。 2)利用DNA不溶于酒精但细胞中某些蛋白质溶于酒精的性质可使DNA与蛋白质分离得到初步纯化的DNA。 3)在沸水中DNA遇二苯胺呈现蓝色反应。 2、DNA粗提取的方法步骤怎样?有什么主要注意问题? 注意问题: 1)材料要选用DNA含量较高的生物组织; 2)整个实验中三次用到2mol/L的NaCl溶液; 3)酒精最好用95%的冷酒精; 4)二苯胺试剂最好现配现用,如果从冰箱取出,用时要先摇匀; 5)加蒸馏水或加入酒精用玻棒搅拌时,动作要轻缓且朝一个方向。 3、解决教材其他练习题。 反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质的原因是: 用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶于低盐溶液中的物质。 练习巩固 1、向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水,在这个过程中DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是 A 减小;减小 B 增大;增大 C 先减小后增大 D 减小;增大 2、欲使溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,最有效的办法是 A 加蒸馏水 B 加矿泉水 C 加清水 D 加生理盐水 3、与析出DNA粘稠物有关的叙述,不正确的是 A 操作时缓慢滴加蒸馏水,降低DNA的溶解度 B 操作时用玻棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整 C 加蒸馏水可以同时降低DNA和蛋白质的溶解度 D 当丝状粘稠物不再增加时,NaCl溶液的浓度可以认为是0.14mol/L 4、你能采用其他方法对DNA进行鉴定吗? 1)用甲基绿染液。结果丝状呈现绿色。详见(必修1P26) * * *
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