拉曼光谱法结合薄层层析分析红酵母色素.pdfVIP

第32卷，第3期 光谱学与光谱分析 v01．32，No．3。pp695—698 2 01 2年3月 and March，2012 SpectroscopySpectralAnalysis 拉曼光谱法结合薄层层析分析红酵母色素 袁玉峰1～，陶站华2，王 雪1’2，黎永青3，刘军贤1’ 1．广西师范大学物理科学与技术学院。广西桂林54l004 2．广西科学院牛物物理实验室。广西南宁530003 3．东卡罗莱纳大学物理系，美国北卡罗莱纳，27858—4353 摘要利用薄层层析色谱法分离红酵母色素。结果显示，红酵母细胞能合成至少三种色素，即p胡萝卜 素、红酵母红素、圆酵母红素；采集三种色素的拉曼光谱，光谱数据经过背景扣除、基线校正、三点平滑等 方法预处理，统计不同色素的平均光谱，结果表明三种色素的C—C拉曼位移不同，并且p胡萝卜素的拉 曼位移最多，红酵母红素和圆酵母红素的含鼍较多；定量分析色素特征峰高比值，各色素峰高比值差异不 大，峰高比值能用作参数，为深入研究活体细胞内色素的相对含量提供参考。以上结果表明，拉曼光谱法结 合薄层层析能够分析红酵母色素，可以提供红酵母色素的丰富信息，是研究色素的有效方法。 关键词拉曼光谱法；薄层层析；红酵母色素；拉曼峰高比值 中国分类号：()657．3文献标识码：A DOI：10．3964／j．issrL1000．0593(2012)03一0695一04 谱数据进行扣除背景、基线校正、三点平滑等化学计量学预 引 言 处理，分析不同色素的拉曼光谱，找出不同色索间的光谱差 异，统计特征峰高的比值，寻求分析红酵母色素新参数的可 类胡萝卜素是具有异戊二烯结构的色素，具有防癌、抗 能性。 癌、预防心脑血管疾病、抗机体衰老的功效。许多微生物都 生产类胡萝卜素，红酵母在缺乏营养，生理状态受到抑制的 1实验部分 环境下开始大量生产类胡萝卜素uJ。Sal【aki等【20报道红酵母 主要合成三种色素，即p胡萝卜素、圆酵母红素和红酵母红 1．1细胞培养及色素混合液制备 素。检测类胡萝卜素的的手段主要有：紫外光谱法[3]、高效 8-胡萝卜素标准品购自Si鲫Aldrich公司，实验所用红 液相色谱法[“，拉曼光谱法L5J，拉曼光谱是一种分析生物细酵母菌株由广西大学应用微生物研究所提供，生长彻 (10 胞内分子结构和含量的有用工具，拉曼谱峰的位置、强度和 g酵母提取物、20g蛋白胨、20g葡萄糖、15g琼脂)平 峰宽可提供分子振动、转动方面的信息，据此可以反映分子 板上的菌落接种于YEPD(不含琼脂)液体培养基中，在28 mL发酵培养 中不同的化学键和官能团，此外，在适宜的激光波长和功率 ℃下培养16h至指数生长期，然后转接入50 下，样品不会受到损伤曲]，拉曼光谱现已广泛应用碳纳米材 基进行发酵培养，50mL液体发酵培养基的pH值为6．o，所 料缺陷鉴定￡“、孢子萌发L8]、脂类代谢等[列研究，目前国内 含的各物质浓度如下：葡萄糖(40g·L_1)、KH2PO{(8g· 还未见拉曼光谱研究红酵母色素的报道。 L．1)、MgS(^·7H2()(o．5g·I。_1)、酵母提取物(5g· 红酵母合成的类胡萝卜素是天然色素，具有一个显著的 L^1)，接种后的发酵培养基放置在200r·TIlin～，28℃的摇 优点就是安全无毒，然而如何分离、鉴定红酵母所合成的色 床上发酵培养至终点，发酵终点菌液经过洗涤