凝胶渗透色谱多角度激光散射联用技术研究红芪多糖中4个组分分子特征.pdfVIP

第 37卷第 l2期 Vo1．37．Issue 12 2012年6月 June，2012 凝胶渗透色谱．多角度激光散射联用技术研究 红芪多糖 中4个组分分子特征 陈同强 ，ADILBEKOVJ ，王娟 ，沈孝丽 ， 石义凯 ，胡芳弟 ，封士兰 ， (1．兰州大学 药学院，甘肃 兰州730000；2．甘肃省新药临床前研究重点实验室，甘肃 兰州730000； 3．塔什干药物研究所，乌兹别克斯坦 塔什干 100015) [摘要] 目的：测定红芪多糖3(HPS一3)中4个组分的绝对分子量 ，相对分子质量分布 ，均方根旋转半径 (R)，多分散系 数(Mw／Mn)等分子特征参数 ，以均方根旋转半径 (R)对重均分子量 (Mw)作图，计算4个组分在溶液状态的构象。方法：采 用凝胶渗透色谱一多角度激光散射 (GPC：MALLS)联用技术 ，流动相为含0．02％NaN，的0．1mol·L NaNO溶液，Ultrahydro— gel1000，500色谱柱串联。结果：HPS一3的4个组分中，HPS3一c的Mw最大(1．986×10g·mol )；其次为 HPS一3一B(1．1l3 ×10 g ·mol )和 HPS一3一D (8．457×10 g ·mol )；HPS一3A的 Mw最小 (1．223×10 g ·mol )，而 R最大 (55．5nm)。 HPS3一D相对分子质量分布范围最广，Mw／Mn2．543。在流动相中，HPS一3一A为球型构象，HPS一3一C为无规则线团构象 ，HPS一 3一B和HPS一3．D则均为高枝化度结构。结论：为进一步研究 HPS一3中4个组分分子特征与其生物活性的关系提供必要依据。 [关键词] 红芪多糖；凝胶渗透色谱 ；多角度激光散射；分子特征 红芪系豆科岩黄芪属植物多序岩黄芪Hedysar— 除色谱和光散射联用(GPC．MALLS)为绝对方法，可 umpolybotrysHand．．Mazz的根，为甘肃特产名贵药 直接测定 Mw，Mw／Mn，R。GPC—MALLS联用技术 材。作为传统中药 ，在临床上具有强心，降糖 ，利尿 ， 测定相对分子质量时受样品结构及相对分子质量限 抗病毒，抗衰老等功效…。红芪多糖是红芪的主要 制小 ，不依赖泵流速 ，不需要标准品作对照，就可直 活性成分之一，其中HPS．3部分具有较 明显的降血 接测得重均分子量 ，更重要的是 ，该技术还可提供样 糖 及体外抗氧化 等作用。目前国内外对红芪 品在溶液状态下构象信息。 的化学成分已有了较详细的报道l4J，而对于红芪多糖 1 材料 研究，主要集 中在化学结构 及一些药理作用 。。。 BS一100N 自动部分收集器，BT100N数显恒流泵 的研究。多糖作为生物高分子化合物，其药理活性， (上海青浦沪西仪器厂)；CR22G II型离心机 (日本 不但取决于多糖链 的化学结构 ，与多糖本身 的溶解 日立公司)；BUCHIR一200旋转蒸发仪 (瑞士 Buchi 度、相对分子质量及分布、支化度、链构象等物理性质 公司 )；LABCONCO 型 真 空冷 冻 干燥 仪 (美 国 也有着密切关系。由于多糖的生理功能主要是在人 LABCONCO公司)；Waters高效液相色谱仪；Wyatt— 体的体液环境中实现，因此，只有弄清多糖分子在溶 DAWNHELEOS十八角度激光光散射仪(Astra处理 液中的链构象才能深入研究其生物活性。本实验测 软件 ，美国怀雅特公司)；BS．224S1／1万分析天平 定了 HPS．3中4个组分在溶液 中的绝对分子量 (Sartorius公司)o (Mw)、多分散系数 (Mw／Mn)、均方根旋转半径(R) 红芪药材购 自甘肃武都，经兰州大学药学