使用Morphologi G2 对药膏进行QC 显微镜自动化测量.DOC

使用 Morphologi G2 对 药膏进行 QC 显微镜自动化测量 介绍 在质量控制 (QC) 程序中，许多制药公司依靠显微镜进行分析，借以识别、限定或量化满足特定尺寸标准的固体颗粒。QC 分析的规范符合该产品的目标销售国主管当局的要求。例如，此规格可能将固体颗粒的数量限制为 90%（长度小于25 μm）和 100%（长度小于100 μm）之间。通常，该方法还会定义要在测试中使用产品的数量。在实践中，样品经过分析员扫描，然后对总颗粒数量和符合规格的固体颗粒百分数进行评估。样品必须通过分析，该批产品才能进行发布以供进一步处理和销售。 通常来讲，这种手控显微镜方式会消耗分析员大量的时间，同时，不同分析员之间可能会出现人为主观性差异。 Morphologi G2 能够将这种方法自动化，从而缩短分析时间、自由控制操作时间，并减少因人为主观性和/或疲劳产生错误。此外，该系统可根据其形状区分颗粒，并可设定分类以识别颗粒数量或比例，例如，标本中的球状和针状颗粒。 示例 – 软膏中的针状晶体计数 在此特殊示例中，使用 Morphologi G2 使传统手控显微镜质量控制程序自动化，包括监控药膏中的活性药用成分 (API) 的针状颗粒数量。在此特殊的商用软膏中，其中一种活性成份以长而细的针状晶体显示，且均匀地溶解在软膏中（图 1）。 以显微镜为基础的产品质量控制规格要求在 3 mg 的样品中，颗粒长度不得大于 250 μm，同时长度大于 100 μm 的颗粒不得超过 100 个。同时要计数长度在 50 至 100 μm 间的颗粒数量，以备参考之用。目前，就手控显微镜分析来说，每种样品可能需要 2 个多小时，而且可能会存在人为偏差。Morphologi G2 自动化测量可将样品分析时间减少到 15 分钟以内。针状晶体能够以不受人为客观影响的方式进行识别、测量、计数和分类。  图 1：药膏中的针状晶体图像  Morphologi G2 的其他优势体现在可为所有分析的颗粒保持永久性记录，而手控显微镜只能记录少量且具有代表性的颗粒。 当前程序 软膏的基层是石蜡介质，这样可在室温下通过显微镜对不同针状颗粒进行识别。加热样品会熔化石蜡介质，从而识别晶体（图 1）。 当前程序包括将 3 mg 的样品放到盖玻片上，然后再将此玻片放到显微镜载玻片上，使软膏位于载玻片和盖玻片之间。然后，将样品在热板上加热到 65 °C，使石蜡基层熔化。样品展开，并完全覆盖住盖玻片下的区域。然后，准备好的样品就会传到显微镜，以供人工分析这些针状颗粒。样品的人工分析包括操作员识别和测量所有长度大于 50 μm 的颗粒。后者包括对载玻片上下扫描 20 次，并确保每次扫描边缘的颗粒不会被重复计数。在此过程中，样品会逐渐冷却，且石蜡基层会凝固，以防止干扰晶体识别。 因此，分析时必须将样品多次加热，而且在重新加热时，颗粒可能会略微有所移动。每次重新加热载玻片时，分析员都必须记住颗粒在载玻片上的位置，以避免遗漏颗粒计数或重复计数。正常情况下，测量 3 mg 样品的总时间大约需要 2 小时，取决于分析员的经验和样品中晶体的数量。 自动测量 Morphologi G2 是一种高灵敏度的自动图像分析系统，针对高规格显微镜平台而设计，用来表征颗粒的大小和形状等特性。它还具有分类功能，可将满足指定标准的颗粒计数为该级别的一部分。 分析样品有既定的标准操作程序 (SOP)。SOP 含有用于测量的所有软件和硬件变量，从而使每次测量都以相同的方式进行。使用 SOP 可排除不同用户或不同位置所造成的偏差，因为这样的偏差极易在仪器之间转移。 图 2：该图片说明使用热风枪让样品保持 65 °C。 如上所述，将样品置于显微镜载玻片和盖玻片之间，然后加热到 65 °C，来准备样品。然后，将载玻片放在 Morphologi G2 的载玻片支座上，再使用控制温度的热风枪将样品温度控制在 65 °C（图 2）。 表 1：针对自动分析制定的分类标准。 该仪器根据 SOP 并通过扫描定义的区域和实时分析颗粒来测量样品。系统还记录每个颗粒的 x、y 坐标，以确保不会计数两次。测量时间不超过 10 分钟。该分类功能可用来将不同长度的针状颗粒分到一组。定义的级别如表 1 所示： 在完成测量后，会存储所有颗粒的图像，并且可以在颗粒视图中查看每个级别的单个颗粒。 如果操作员想查看任意单个颗粒的详细资料，例如以更高的放大率，他们可单击颗粒视图中的颗粒，然后就会自动从记录每个颗粒的 x、y 坐标处将其返回到样品中。如有需要，可拍摄感兴趣颗粒的观察区域图片。 所有分析结果会汇总到记录视图中，并可以显示或按照自定义报表中的表格格式打印（表 2）。显示特定级别颗粒的报告也可以自定义（表 3）。    表 2：在 SOP 内