血竭蜈蚣油对豚鼠创伤性鼓膜穿孔组织修复中EGF、VEGF表达的作用.pdf

陕西中医学院学位论文原创性声明及使用授权声明 lililll lll lll l I|lll il 学位论文原创性声明 y286曼028 本人郑重声明： 所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工 作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论 文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡 献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律 结果并由本人所承担的法律责任。 学位论文作者签名(需亲笔)雄 日期：如哇年S月p日 关于学位论文使用授权的声明 陕西中医学院有权保留使用本人学位论文，同意学院按规定向国家有关部门机构 送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权陕西中医学院可以将本学 位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印 手段保存和汇编本学位论文。可以公柿(包括刊登)论文的全部或部分内容。 保密口，在一年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密曰。 (请在以上方框内打“4”) 论文作者签名(需亲笔) 同期：知心年j月≯F1 论文导师签名(需亲笔) R期：劫c厂年，月沙同 万方数据 摘要 目的：本实验旨在既往生长因子对创伤性鼓膜穿孔愈合机制研究的基础上，通过 建立豚鼠创伤性鼓膜穿孔模型，观察血竭蜈蚣油对豚鼠创伤性鼓膜穿孔修复及愈合组 织中表皮生长因子 (Endothelialfactor，EGF)、血管内皮生长因子 growth endothelialcell (Vascular growthfactor，VEGF)表达的影响，从而探讨血 竭蜈蚣油对促进EGF、VEGF分泌及其与经过一系列生化反应作用于鼓膜，对修复的影 响，以此探讨血竭蜈蚣油修复鼓膜穿孔的组织细匏学机制。为临床应用药物治疗创伤 性鼓膜穿孔，从调控生长因子表达方面研究提供新思路。 方法：实验研究。豚鼠50只全麻后于自制的手术台上侧身固定，消毒外耳后于 耳前切迹处去毛，耳周及耳前切迹处局部浸润麻醉后，牵拉耳廓，调整显微镜内窥镜， 于镜下暴露完整的鼓膜，用烧红的针尖刺开鼓膜紧张部，形成直径约3mm的圆形穿孔， 同法对侧术耳造模。造模成功后随机分为模型组、血竭蜈蚣油高浓度组、血竭蜈蚣油 低浓度组，各组不少于15只(30只耳)。 血竭蜈蚣油高浓度组动物隔日于穿孔边缘局部湿敷lg／ml血竭蜈蚣油0．Iml，连 续5次；血竭蜈蚣油低浓度组动物隔日于穿孔边缘局部湿敷0．59／ml血竭蜈蚣油 0．1ml，连续5次；模型组外耳道放置棉球，保持外耳道干燥。 分别于首次给药第3、5、7、10、14天时，用显微内窥镜于同一位置观察各组豚 鼠鼓膜愈合情况后随机抽取3只(6耳)处死，取下颞骨，用10％甲醛中固定24h， 分离听泡，脱钙处理，石蜡包埋，切片，常规HE染色，光镜下观察三层组织的生长 Pro—Plus 愈合情况。并通过免疫组化SABC法和Image6．0图像分析系统，观察鼓膜 穿孔周围组织上皮层及纤维层中EGF、VEGF表达情况。 结果：给药后第3、5、7、lO、14天在光镜下观察鼓膜的HE染色切片，血竭蜈蚣 油高、低浓度组外层鳞状上皮层、中间纤维层组织生长愈合情况优于模型组：免疫组 化SABC法结果显示血竭蜈蚣油高、低浓度组上皮层与纤维层中EGF、VEgF的表达明显 优于模型组，有显著统计学差异，证明血竭蜈蚣油有促进成上皮层及纤维层