杈杷果的组织培养与快速繁殖.pdf

植物生理学通讯 第45 卷第3 期，2009 年3 月 277 杈杷果的组织培养与快速繁殖 胡海涛, 杨玲* 浙江师范大学化学与生命科学学院, 浙江金华321004 Tissue Culture and Rapid Propagation of Lonicera fragrantissima subsp. standishii (Carr.) Hsu et H. J. Wang. * HU Hai-Tao, YANG Ling College of Chemistry and Life Sciences, Zhejiang Normal University, Jinhua, Zhejiang 321004, China 1 植物名称 杈杷果[Lonicera fragrantissima subsp. standishii (Carr.) Hsu et H. J. Wang.], 又名苦糖果、 无核樱桃、健身果。 2 材料类别 带侧芽的幼嫩茎段和茎尖。 3 培养条件 以MS 为基本培养基。(1) 启动培养 -1 基: MS+6-BA 2.2 mg·L (单位下同)+NAA 0.2; (2)丛 生芽诱导和增殖培养基: MS+6-BA 3.4+NAA 0.2; (3)壮苗培养基: MS+6-BA 1.1+NAA 0.2; (4)生根培 养基: 1/2MS+IBA 2.0 。以上培养基中均加入 0.7% 的琼脂和3% 的蔗糖, pH 5.8 。培养温度为 (25±2) -2 -1 图1 杈杷果丛生芽的增殖 ℃; 光照强度为20~30 µmol·m ·s , 光照时间 -1 16 h·d 。 4 生长与分化情况 培养。60 d 后小苗基部可长出数条长约1 cm 的 4.1 启动培养 剪取当年生带侧芽的幼嫩茎段和茎 不定根, 苗高可达5~8 cm, 生根率95% 以上。将 尖, 除去叶片, 洗洁精浸泡后, 在流水下冲洗1 h, 然 生根苗的培养瓶瓶盖打开, 炼苗3 d, 轻轻取出小 后在超净工作台上, 将带侧芽的茎段和茎尖切成 苗, 洗净根系上的培养基, 移栽到泥炭、珍珠岩、 1.5 cm, 放入75% 的乙醇中浸泡30 s, 再用2% 的 蛭石(1:1:1)混合成的基质中, 注意保温、保湿, 成 次氯酸钠(加1 滴80% 吐温)消毒15~20 min, 无菌 活率可达90% 以上( 图2) 。 水冲洗5次, 用无菌滤纸吸干外植体材料表面的水, 切去两端的褐化部分, 接种到培养基(1)上。接种 10 d 后侧芽开始萌动, 幼嫩叶片开始长出, 茎基部 出现膨大, 30 d 后有少量不定芽形成。 4.2 丛生芽的诱导和壮苗培养 将启动培养基上新 生不定芽切下来接种到培养基(2)上, 30 d 后有大 量丛生芽生成。反复分切丛生芽, 接种到增殖培养 基(2)上培养, 可以获得大量的丛生芽( 图1), 增殖 率为4~5 倍, 而且诱导获得的丛生芽大多是由腋芽 直接萌发形成, 没有经过愈伤组织阶段, 因此变异 图2 杈杷果的移栽苗 率低。将获得的丛生芽切成单芽接种到培养基(3) 上, 培养30 d 后, 芽逐渐长高长壮。 4.3 生根与移栽 经壮苗培养后, 将高2.0~3.0 cm的 收稿 2009-01-05 修定 　2009-02-11 增殖苗切成单芽, 接种到生根培养基(4)上进行生根 * 通讯作者(E-mail: yangl@zjnu.cn; Tel: 0579 。 278 植物生理学通讯 第45 卷第3 期，2009 年3 月 5 意义与进展 杈杷果是忍冬科忍冬属中一种特异 效蓉等2005; 王晓明等2006; 孙朝晖和尹会荣 珍稀木本矮化野生果树, 果实为合生果, 呈罕见的