第8章糖和糖苷-2.ppt

§ 8.4 糖和苷的分离方法 (I) -- 按分离原理(或分离方法)分类 ;8.4.2 利用 酸碱性或解离度差异 分离 利用 酸碱性 差异 8.4.2. 1 铅盐沉淀法（同前述） 8.4.2. 2 季铵盐/氢氧化物沉淀法 利用 解离度 差异 8.4.2. 3 离子交换法 (1) 离子交换 法 (2) 离子交换纤维素 层析法 (3) 使用硼酸处理的强碱性阴离子交换树脂法;8.4.2.2 季铵 盐/氢氧化物沉淀法 是一类乳化剂 结构式 见 教材 应用： 可将 酸性多糖从中性多糖中分离，;原理： 1. 季铵盐/氢氧化物 通常只与 酸性多糖 生成沉淀, 使之分离。 方法：控制季铵氢氧化物浓度可得到不同 酸性多糖 ，控制 pH 9。 2. 升高 PH，某些中性糖 也能被 沉淀 （—OH 的解离度 增大）， 方法：在 不同 pH 下 分步 沉淀 （酸性、中性、碱性等） 得到 不同多糖。季铵盐/氢氧化物pH梯度沉淀 加入硼砂缓冲液，某些中性糖 也能被 沉淀 原理：糖与硼酸络和，增强酸度，P.76;利用解离度差异：; 去除： 选用： 得到： 注意事项： ;增大其 解离度;(2)．离子交换纤维素层析法 （离子交换＋纤维素层析） 阳离子交换纤维素 阴离子交换纤维素 常用型号：Ｐ１03，一般了解 应用：分离酸性/碱性多糖 洗脱方法： 不同浓度的缓冲溶液; (3)硼酸处理的强碱性阴离子交换树脂 原理：中性糖 与 硼酸 络合（NP.77） 可 增加 酸 性 增大 解离度，能选择性交换。 洗脱方法： 不同浓度的 硼酸盐 溶液 应用： 单糖 、低聚糖、中性多糖 效果好 缺点： 洗脱体积大 后处理烦 ;8.4.2 利用 酸碱性或解离度差异 分离小结 两沉淀 （1）铅盐沉淀法（如前述） 盐 试剂 沉淀法 （2）季铵氢氧化物沉淀法 碱 试剂 沉淀法 三交换 (1) 离子交换法 (2) 离子交换纤维素层析法 (3) 使用硼酸处理的强碱性阴离子交换树脂层析法 ;§ 8.4 糖和苷的分离方法 (I) -- 按分离原理(或分离方法)分类 ;8.4.3 利用吸附性差异;应用： 注意事项：;分离 单糖 和 低聚糖 （含单糖数目多者， 下）;１ 先水洗 ２ 渐增洗脱液中的乙醇浓度;１．活性炭 预处理 方法： 盐酸液 煮沸，蒸馏水洗净 （2 – 3 mol/ L） ２．需要 增加 洗脱速度，方法： （1）加压 （2）装柱时，拌入等量硅藻土， 弊：会使吸附容量降低 （3）或用４０-６０目稍粗的炭;8.4.3 利用吸附性差异;§ 8.4 糖和苷的分离方法 (I) -- 按分离原理(或分离方法)分类 ;8.4.4 利用 差异;(1) 分离 分子量不同的 糖、苷 @ 例如，低聚糖、苷、或多糖。 大分子的糖（ ）洗下， 比较活性炭法： 大分子 （ ）下;（2）分离 形状不同的 分子： 如 直链 和 支链 多糖 支链糖/苷 （ ） 下 @;分离 低聚糖和苷：用孔隙（ ）的 分离 多糖 用孔隙（ ）的 多糖 纯化去小分子杂质 用孔隙（ ）的;§8.4 糖和苷的分离方法 (I) -- 按分离原理(或分离方法)分类 ;8.5 糖和苷的分离方法 (II) -- 按分离目的分类 @ 8.5.1 8.5.2;8.5.1 除去 非糖杂质的 方法 ---- 制备（精制）总糖、总苷 思路? 寻找差异 首先要考虑性质差异; 糖; 糖;