糖基化血红蛋白形成过程.doc

糖化血红蛋白 信息类别：产品专业知识　作者：admin 发布时间：2008-7-23 15:23:48　浏览量：831 次 糖化血红蛋白 一、概述 血糖测定可以评估收集血样时糖尿病患者的碳水化合物代谢情况。相反的，糖化血红蛋 白和果糖胺可以回顾性地评价血糖，很大程度上它们不依赖于病人的生理节奏模式、饮食及其他短暂性的葡萄糖浓度波动，而综合了几天或几周过程内这种波动。 葡萄糖及其他单糖和蛋白质的自由氨基反应，取决于它们的浓度。另一方面，就蛋白质而言，各氨基的Pk和邻近的多肽结构是反应的关键限速步骤。这种不可逆的、非酶催化的反应称为糖基化。 除血浆蛋白的半衰期和浓度不同以及有时体内波动相对大之外，糖化血红蛋白作为一个长期的参数评定血糖浓度特别适合。 血红蛋白的半衰期定义为红细胞存活时间，相对恒定在100～120 d。除血红蛋白半衰期的影响外，糖化程度基本取决于血糖升高的程度以及持续时间。糖化是不可逆的，并且降解血红蛋白糖化位点的酶系也未知。 总的糖化血清蛋白的检测分析，因葡萄糖-蛋白复合物中的酮胺结构，又称果糖胺。测定单一糖化蛋白（主要白蛋白），这些试剂已经商品化。由于存在许多分析和解释的问题，果糖胺的测定通常不用来监测糖尿病。因此该试验不在这里详细讨论。 在一些病例中，糖化血红蛋白的测定并不可靠或价值有限，果糖胺的测定短时间内可作为长期血糖监测的一种替代方法。 糖化血红蛋白 自从1968年第一次描述了在糖尿病患者中发现的异常血红蛋白以来，关于葡萄糖及其他碳水化合物与血红蛋白结合的糖化产物的术语，已经变化几次。自从1986年，IUPAC-IUB（国际纯化学与应用化学联合会）已经推荐使用糖化血红蛋白这一名称，即非酶促的血红蛋白的糖基化。另一方面，更高级的术语糖基化血红蛋白经常地用于日常语言和现在的出版物里。 根据每个糖化位点和反应参与物，总的糖化血红蛋白分成若干个亚组分。天然（非糖化）血红蛋白是A0（2α、2β链)。亚组分（HbA1a1 , HbA1a2 , HbA1b和HbA1c）因血红蛋白β链-N末端缬氨酸的游离氨基与不同碳水化合物糖基化而形成。这些亚组分总称为HbA1。除了血红蛋白β链的N末端缬氨酸外，血红蛋白分子内其他游离氨基也参与糖基化（α链N末端缬氨酸、赖氨酸ε-氨基）。相对于HbA1，所有β-链N末端和其他游离氨基糖基化的血红蛋白被称作总糖化血红蛋白。 除基本的成人血红蛋白AO外，在健康人里发现少量的胎儿血红蛋白HbF（2α、2γ链）和血红蛋白A2（2α、2δ链）。缬氨酸在δ链N末端，以类似的方式糖基化，例如，通过与葡萄糖的共价键形成HbA2c。 表1 糖化血红蛋白命名 HbA （95%～97%） 血红蛋白A HbA0 （90%） 非糖化血红蛋白部分 HbA1 （5%～7%） 糖化血红蛋白A0（α2β2） -HbA1a 糖化血红蛋白HbA1β链 HbA1a1 果糖-1，6-二磷酸的糖化 HbA1a2 葡萄糖-6-磷酸的糖化 -HbA1b HbA1带有未知反应部分 -HbA1c 75%～80%的HbA1，在β链-N末端缬氨酸D-葡萄糖糖化 1-HbA1c 不稳定的HbA1c（醛亚肽） S-HbA0 稳定的HbA1c（酮胺） HbA2 (＜3%) 血红蛋白A2（α2δ2） HbF (＜1%) 血红蛋白F（α2γ2） 亲和层析测定的糖化血红蛋白作为总糖化血红蛋白。 二、指征 -糖尿病中碳水化合物代谢长期的回顾性的监测。糖化血红蛋白测定推荐频率取决于糖尿病种类和（或）治疗（表2）。 三、检测方法 分析糖化血红蛋白有几个实用的方法（表3）。 阳离子交换色谱法 原理：糖化导致血红蛋白分子表面阳离子丢失。在弱的阳离子交换剂中，例如Biorex70，伴有增加的离子浓度和（或）pH下降，糖化血红蛋白在非糖化血红蛋白前先洗脱。这现象产生了糖化血红蛋白最初的术语“快速血红蛋白”。阳离子交换色谱法可用于小型、微型或大型柱层析方法或部分或全自动的PHLC/FPLC方法。因为，其他翻译后修饰血红蛋白，例如醛亚胺型、甲酰化、乙酰化、乙醛加合物、降解物、老化人工物品和异常血红蛋白电荷交换也不同于正常的HbA0，所以已经列出了许多阳离子交换层析法的干扰因素。使用常规HPLC的方法。分离糖化血红蛋白亚组分是能达到满足需求的临床精密度。然而，已知HbA1c的峰不是均一的而是包含一重要的非糖化血红蛋白部分。少数糖化血红蛋白也整合到HbA0主峰中。通过使用特殊的柱原料（poly-CATA）和30～40 min分离时间可以改善分离效果。这些方法可以作为参考步骤但不适合常规使用。所有的阳离子交换色谱法对pH和温度的