膜表面核仁素对脂多糖所致tnf α和il 1β表达的影响 - 中南大学学报 .pdf

中南大学学报（医学版） 　２００８，３３（１１） ＪＣｅｎｔＳｏｕｔｈＵｎｉｖ（ＭｅｄＳｃｉ） ９９９ 膜表面核仁素对脂多糖所致ＴＮＦ和ＩＬ１ 表达的影响 α β １，２ １ １ １ １ １ １ １ 方立 ，王慷慨 ，蒋磊 ，蒋碧梅 ，韦星 ，宋岚 ，邓恭华 ，肖献忠 （中南大学　１．湘雅医学院病理生理学系休克研究室，长沙４１００７８；２．湘雅医院心内科，长沙４１０００８） ［摘要］　 目的：观察人 ＴＨＰ１细胞膜表面核仁素对脂多糖（ＬＰＳ）所致 ＴＮＦ 和 ＩＬ１ 表达的影响。 α β 方法：采用免疫荧光、免疫印迹等方法观察核仁素在 ＴＨＰ１细胞膜表面表达。利用抗体封闭策略使膜表 面核仁素失活，以ＬＰＳ刺激 ＴＨＰ１细胞的炎症细胞模型，采用逆转录 ＰＣＲ和酶联免疫吸附实验观察炎 症因子 ＴＮＦ 和 ＩＬ１ 的表达与分泌。结果：免疫荧光结果显示核仁素呈斑点状位于细胞膜表面；免疫 α β 印迹检测显示核仁素和 Ｆａｓ存在于ＴＨＰ１细胞膜蛋白中。逆转录ＰＣＲ结果显示 ＬＰＳ（１０００ ｇ／Ｌ）处理 μ １，２，３，４ｈ后，ＩＬ１ 和 ＴＮＦ ｍＲＮＡ均表达上调，而核仁素抗体封闭明显抑制二者的表达。酶联免疫 β α 吸附检测发现，ＬＰＳ（１ｍｇ／Ｌ）刺激４，１２，２４ｈ后，促进 ＴＨＰ１细胞分泌 ＴＮＦ 和 ＩＬ１ ，而核仁素抗体 α β 封闭显著抑制 ＬＰＳ所致的炎症因子释放（Ｐ＜０．０５）。结论：ＴＨＰ１细胞膜表面核仁素参与介导 ＬＰＳ所 致早期炎症介质 ＩＬ１ 和 ＴＮＦ 的表达与分泌。 β α ［关键词］　 核仁素；　ＴＨＰ１单核细胞；　脂多糖；　炎症因子；　基因表达 ［中图分类号］　Ｑ７８６　［文献标识码］　Ａ　［文章编号］　１６７２７３４７（２００８）１１０９９９０６ Ｒｏｌｅｏｆｃｅｌｌｓｕｒｆａｃｅｎｕｃｌｅｏｌｉｎｉｎｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆＴＮＦ ａｎｄＩＬ１ α β １，２ １ １ １ １ ＦＡＮＧＬｉ ，ＷＡＮＧＫａｎｇｋａｉ，ＪＩＡＮＧＬｅｉ，ＪＩＡＮＧＢｉｍｅｉ，ＷＥＩＸｉｎｇ， １ １ １ ＳＯＮＧＬａｎ，ＤＥＮＧＧｏｎｇｈｕａ，ＸＩＡＯＸｉａｎｚｈｏｎｇ （１．ＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＳｈｏｃｋ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ＸｉａｎｇｙａＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ， ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１００７８；２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣａｒｄｉｏｌｏｇｙ，ＸｉａｎｇｙａＨｏｓｐｉ