绿色荧光蛋白基因标记棉花黄萎病菌.pdf

ＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ， （）： 　 ２０１３ ３９ ５ １２８１３３ 　 － 绿色荧光蛋白基因标记棉花黄萎病菌 ＊ ， ， ， ， ， 徐 明 桂月晶 祁伟彦 柳少燕 陈捷胤 戴小枫 　 　 　 　 　 　 （ ， ） 中国农业科学院农产品加工研究所 北京 １００１９３ 　 ， 摘要 以携 带有潮 霉素 抗 性 筛选标记 的 ＣＴＨ 载体为 骨架 构 建了含 有 增 强 型 绿色 荧光蛋 白基 因 ｓＧＦＰ的载体 　 ｐ ｙｇ ， ， ＣＨ ｓＧＦＰ 并通过农 杆菌 介 导的遗传 转化 法导入 引起棉 花黄 萎 病的高 致 病力大 丽轮枝 菌 Ｖｄ９９１ 获得 了 ｓＧＦＰ整 ｐ － 。 、 ， 合 到 大丽轮枝 菌基 因组 的转化 株 通过 转化子 荧光信 号 生 长 表 型和 致 病 力 筛 选鉴 定 获得 了 株 与 生 长 １ Ｖｄ９９１ 和 致 病力 无显 著 差异且荧光信 号 强烈 的转化 株 。侵 染棉花根 部 试验表 明 ， 侵 染棉 花后 快速 扩展 Ｖｄ ｆ７７ Ｖｄ ｆ７７ －ｇｐ －ｇｐ ， 。 ， 繁殖 子代 仍 然 能发出 强烈 的 荧光信 号 本 试验 绿色 荧光蛋 白标记 大丽轮枝 菌 的成 功 构 建 为后 续 大丽轮枝 菌侵 染 棉 花过程 的组 织 学和致 病机理研究 提供 了 良好的研究 材料 。 关键词 大丽轮枝 菌 ； 绿色 荧光蛋 白 ； 农 杆菌 介 导法 ； 激发 荧光 　 　 　 　 中图分类号： 文献标识码： ： ／ Ｓ４３５．６２１．２ Ａ ＤＯＩ １０．３９６９ ．ｉｓｓｎ．０５２９ １５４２．２０１３．０５．０１８ 　 　 　　 　 　　 　 ｊ － Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｄａｈｌｉａｅ ｌａｂｅｌｅｄｗｉｔｈ ｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｒｏｔｅｉｎ ｅｎｅ