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101 微紫青霉cbh i酶纤维素结合结构域在大肠杆菌中的分泌型表达及
ISSN 中国生物化学与分子生物学报 第16卷第5期
CN 113870Q Ch in. J. B iochem. M o l. B io l. 2000, V o l. 16, N o. 5, 644～ 649 2000年 10月
微紫青霉 CBH 酶纤维素结合结构域在
大肠杆菌中的分泌型表达及性质研究
汪天虹 邹玉霞 石屹峰 高培基 刘 佶 吴 静
( 山东大学微生物技术国家重点实验室, 济南 250100)
摘要 为研究纤维素酶纤维素结合结构域的结构与功能, 进而深入了解天然纤维素的生物降解机
制和提高纤维素酶的生物工艺学价值, 采用 PCR 技术体外扩增了携带微紫青霉外切葡聚糖纤维二
糖水解酶 (CBH ) CBD 编码区的DNA 片段, 将 CBD 编码区DNA 片段插入带有 E rw in ia
n
1 前导肽序列的大肠杆菌质粒 上进行了表达 携带微紫青霉 CBH
ca rotovora pe B pKK tac new c CBD
编码区的大肠杆菌重组菌株 5 ( 8) 产生有活性的分泌型 CBH 蛋白
DH pKK tac new . CBD SD S
PA GE 检测显示所产生的 CBD CBH 蛋白分子量约10. 8 kD 在 IPT G 诱导下, 该菌株所产生的
蛋白含量达45. 2 , 且90% 以上的 蛋白分泌到培养物上清液中 结晶纤维素
CBD CBH m g L CBD m CF
11溶液经CBD CBH 处理后, 浊度比对照提高了128. 9% , 天然棉花纤维结构经CBD CBH 处理后产生
o
一定程度的非水解性降解作用, 表明微紫青霉 CBD CBH 具有解聚天然结晶纤维素的作用
关键词 微紫青霉, 外切葡聚糖纤维二糖水解酶 , 纤维素结合结构域, 分泌型表达
c
中图分类号 812 .
Q
Expression and Character istic of Secretary CBD CBH
m
from P en icillium j an th inellum in E. coli
p
, , , , ,
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