二、尤特尔酶制剂对常用饲料原料的体外酶解效果分析.pdf

二、尤特尔酶制剂对常用饲料原料的体外酶解效果分析 二、尤特尔酶制剂对常用饲料原料的体外酶解效果分析 二二、、尤尤特特尔尔酶酶制制剂剂对对常常用用饲饲料料原原料料的的体体外外酶酶解解效效果果分分析析 1. 1. 11.. 实验目的 1.1 研究各种非淀粉多糖酶对常用饲料原料的体外降解效果，从而得到针对某种 饲料原料的最佳应用效果的酶种及添加量。 1.2 建立针对各种原料的体外酶解数据库，为设计针对性较强的饲用复合酶配方 提供参考依据。 2. 2. 22.. 实验材料 2.1 2.1 22..11 饲料原料样品 2.1.1 样品处理 将市场上采集的饲料原料样品分别在80℃条件下烘干至恒重后用密封袋保 存，实验时取部分样品用植物粉碎机粉碎至40目，干燥器中保存粉碎样品。 2.1.2饲料原料种类及来源 菜粕取样于江西，棕榈粕取样于江苏，次粉取样于山东，玉米取样于吉林， 小麦取样于山东，DDGS分别取样于吉林和山东，豆粕分别取样于吉林和山东， 麸皮取样于山东和河南，棉粕取样于新疆与山东，米糠取样于山东市场的米糠粕 以及江西市场的油糠。 2.2 2.2 22..22 酶的种类及其酶谱分析 名称 生产日期 酶活pH6.5 酶活PH4.8 纤维素酶活pH4.8 α-半乳糖苷酶活 真菌中性木聚糖酶 46000IU/g 31880IU/g 6672IU/g － 细菌中性木聚糖酶 18996IU/g 14300IU/g － － 酸性木聚糖酶 37000IU/g 61666IU/g 2321IU/g － 酸性纤维素酶 － － 18009IU/g － 1 α-半乳糖苷酶 200905 － － － 307IU/g 2.3 2.3 22..33 试验用试剂 2.3.1pH6.5缓冲液配制：称取以下两种试剂，搅匀后定容至5000ml，然后用3M 酸或碱调节pH至6.5，置棕色广口瓶中保存。 磷酸氢二钠（Na HPO .12H O）112g； 2 4 2 磷酸二氢钠（NaH PO .2H O）107g。 2 4 2 2.3.2 还原糖DNS配制： 3，5-二硝基水杨酸50g，溶于2000ml蒸馏水，完全溶解为A溶液； 氢氧化钠80g，溶于约1000ml蒸馏水中，完全溶解，为B溶液； A溶液与B溶液混合，搅拌至完全溶解，为C溶液； 酒石酸钾钠1500g，溶于约1500ml蒸馏水，完全溶解为D溶液； C溶液与D溶液混合，定容至5000ml，室温下避光保存7天。 2.3.3 还原糖曲线标准溶液配制：将分析纯葡萄糖置105℃条件下烘干至恒重， 准确称取葡萄糖标准品1.0000g，定容至100ml，标记为10mg/ml 葡萄糖溶液。 标准曲线的绘制：取8 支试管按下表加入相关试液后再加入3.0mLDNS 试 剂,充分摇匀，置沸水浴中反应5min。迅速冷却至室温，用0号试管试液作对照， 在540nm 波长下测其它各试管试液的吸光度。以吸光度为纵坐标，以葡萄糖含 量为横坐标绘制标准曲线。 试管号 0 1 2 3 4 5 6 7 缓冲液加入量（μL ） 1000 990 985 980 975 970 965 960 葡萄糖标准液加入量（μL ） 0