抗体片段的捕获工具.pdf

GE Healthcare Life Sciences 抗体片段的捕获工具 抗体片段将会成为继单克隆抗体（MAbs）后的下一种基于蛋白的生物治疗的重要类别。单克隆抗体提供 的优势之一是可以使用平台方法进行提纯，这种通过蛋白A 亲和色谱法进行捕获的方法已经成为了该行业 的标准。 到目前为止，与全长抗体相比，因为抗体片段的高度多样性，还没有一种类似的抗体片段的提纯平台可供 使用。 随着CaptoTM L 和LambdaFabSelect 色谱分析介质的引进，现在开始出现了首个抗体片段提纯的工业平 台。带有蛋白L 配体的Capto L 是对含有Kappa 轻链的不同大小的抗体片段具有广泛亲和力的一种色谱 分析介质。LambdaFabSelect 是用于捕获含有Lambda 轻链的Fab 的一种亲和力介质。人体内，约有60% 的抗体含有Kappa 轻链，剩下的40%含有Lambda 轻链。具体的比例可能因为重组抗体片段的不同而不 同。Capto L 和LambdaFabSelect 共同覆盖了几乎所有的Fab 以及大部分的较小的抗体片段。 此外，KappaSelect 在Kappa 轻链上的结合区域不同于Capto L，当Capto L 不是最理想的介质时，可 以使用KappaSelect 捕获含有一条Kappa 轻链的Fab。对于含有子类型VH3 的重链结构域抗体的捕获而 言，MabSelectTM 这种蛋白A 亲和介质，是一种有用的备用品。图1 给出了这四种色谱分析介质亲和力示 意图的详情。 Kappa 或Lambda 轻链 重链 VH 结构域 可变区 VL 结构域 恒定区 LambdaFabSelect 和KappaSelect 图1. 用于抗体片段捕获的不同色谱分析介质的结合位点。 所有的这些介质都设计用于工业规模的生产。他们基于一种经充分证明的、高流速琼脂糖基础基质，保证 了高生产率和高动态结合能力。另外，这些介质都有一份管理支持文件并且能获得可靠的供应。图2 是捕 获不同Fab 的适用亲和介质的选择指南。 段 片 结构域抗体 体 抗 型 类 K 轻链 L 轻链 K 轻链 K 轻链 VH3 重链 子 链 品 产 荐 推 品 产 选 备 图2. 捕获抗体片段的亲和介质的选择指南。不同介质的详细信息在其各自的数据文件中有述 （ ）。 超出这些工具的捕获范围以外的抗体片段包括具有L轻链的scFv （单链Fv）片段以及具有VH1、VH2和VH4 子类型的重链结构域抗体。对这些片段而言，我们建议使用离子交换或多峰色谱分析介质，如Capto MMC。