11 配制酒中喹啉黄的测定高效液相色谱法（征求意见稿）.docVIP

DB?? 北京市食品安全地方标准 DB / XXXXX—XXXX ????? 食品安全地方标准 配制酒中喹啉黄的测定 高效液相色谱法 ????? （征求意见稿） ????? XXXX - XX - XX发布 XXXX - XX - XX实施 北京市卫生和计划生育委员会???发布 前??言 本标准为首次发布。食品安全地方标准 的测定 高效液相色谱法 范围 本标准规定了中含量的测定方法。 本标准适用于含量的测定。 原理 试剂和材料 除非另有说明，本法所用试剂均为色谱纯 试剂 甲醇（CH3OH）：谱。 （CH3C）：。 （C6HO7·H2O）。 （H3·H2O）。。试剂配制 （C6HO7·H2O）标准品 标准品：纯度≥9.0%。 标准溶液配制 准确称取标准品（3.3），用溶解并定容至100 mL，使浓度为1mg/mL，置冰箱中保存。 3.4.210.00 mL喹啉黄标准储备液（3.4.1）至100 mL容量瓶中，用水定容混匀，得100 mg/L的标准使用液。 3.4.3标准曲线取个10 mL容量瓶，0.10、0.20、0.50、1.00、2.00、4.00）mL，用至刻度。该标准系列溶液中的浓度分别为1.00、.00、.00、.0、.0、.0）mg/L。 仪器和设备 高效液相色谱：配 4.2恒温水浴。 4.3固相萃取装置。 4.4高速冷冻离心机。 4.5电子天平：感量1 mg。 4.6低温高速离心机（最大转速10000 r/min）分析步骤 试样 5.1.3基体复杂的配制酒（果酒等） 5.1.3.1试样制备 准确移取均匀样品5.00mL于洁净小烧杯中，加入5mL水混匀，于80℃恒温水浴上加热至剩余约2mL，除去乙醇及CO2，加柠檬酸溶液调pH值4~6，水浴至60℃左右，待净化。 5.1. mL加入柱中，开启排液阀；待甲醇液面与柱中固相面等高时，再加水5mL；当柱中液面与固相面等高时，关闭排液阀，将制备好的样品（5.1.2.1）缓缓加入固相萃取柱中，静置5min，开启排液阀并调整排液流速为2滴/s；再用5mL pH4~6的60℃水分三次洗涤小烧杯，洗液转入固相萃取柱中，保持排液流速为2滴/s；待样品液全部通过小柱后，将排液阀开至最大流速，依次分别用pH4~6的水（3.2.6）10mL、甲醇-甲酸溶液（3.2.4）10 mL分3次洗涤，再用水洗至中性。用无水乙醇-氨水-水10 mL分5次解吸，调节流速2滴/s，收集全部解吸液至25mL小烧杯中，加乙酸中和，蒸发至约2mL，以乙酸铵水溶液（3.2.1）洗涤并定容至25 mL容量瓶中，混匀待测。仪器参考条件 高效液相色谱条件 高效液相色谱条件如下： ——色谱柱：（50 mm×4.6 mm， μm）或其它等效柱——流动相：A，；B，。梯度淋洗，参考梯度条件表——流速：.0 mL/min。 ——柱温： ℃。 ——进样体积： μL。标准曲线的制作 将标准系列（3.4.3）注入高效液相色谱，测峰面积，以标准的浓度为横坐标，以目标物峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。标准溶液的液相色谱图参见图。 图1：喹啉黄标准图谱 5.4试样溶液的测定 将试样溶液注入液相色谱中，测峰面积，根据标准曲线得到待测液中浓度,平行测定次数不少于两次。分析结果的表述 按式（1）计算： ………………………………………………（1） 式中： X ——试样中量，单位：g/ c——由回归曲线计算得到的上机试液中的浓度，单位mg/L； co——由回归曲线计算得到的空白样品中的浓度，单位mg/L； V1 ——试样的定容体积，单位mL； V0——取样体积，单位mL； k——样品稀释倍数。 计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值标示，结果保留三位有效数字。 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的0%。 其他 g/mL，检出限为1.7 mg/L，定量限为5.0 mg/L，回收率为85%～110%。 8.2 喹啉黄属于人工混合色素，主要为单磺酸钠盐及二磺酸二钠盐，由于磺酸根在喹啉环上的位置不同而存在同分异构体，共4个峰。 DB11/ XXXXX—XXXX 4