龟版提取物对骨髓间充质干细胞增殖过程中核受体的作用.pdfVIP

广州中医药大学 硕士学位论文 龟版提取物对骨髓间充质干细胞增殖过程中核受体的影响 姓名：宋述财 申请学位级别：硕士 专业：中医基础理论 指导教师：严灿 中文摘要 研究目的 核受体是配体依赖性转录因子超家族，核受体的配体作用几乎包含了生物体发 育、维持自身稳态、细胞分裂、分化等所有基本生命过程。核受体介导的转录活化机 制的研究是近十年生物学研究的热点，继G蛋白耦联受体和离子通道之后，核受体已 成为第三大类非酶性治疗靶点。前期工作发现龟版在体内、外可以促进骨髓间充质干 stem 细胞(mesenchymal 过较长时间诱导后MSC还可能向成骨方向分化。本研究根据中医“肾藏精，主发育” 的理论，在既往研究的基础上，观察龟版提取物对MSCs增殖过程中视黄酸受体 acid D (retinoic receptor，VDR)、 receptor一Ⅱ，RARe)、维生素D受体(vitamin 糖皮质激素受体(91ucocorticoid hormone receptor，ER)、甲状腺激素受体(thyroid actinated 物酶体增殖物活化受体(peroxisomeproliferater 表达的影响，从基因水平探讨中药龟版补肾填精的作用机制，进一步筛选龟版提取物 和作用药理靶点，为龟版提取物的开发与临床应用提供实验依据。 研究方法 使用密度梯度法分离大鼠MSCs进行培养，经5．溴脱氧尿嘧啶标记和CD44免疫 组化染色鉴定后，将体外培养的MSCs分为空白对照组、龟版低剂量组、龟版中剂量 组、龟版高剂量组，加入不同浓度的龟版提取物，分别于龟版提取物作用1211、24h、 ER、TRa、PPAR8的表达。 研究成果 1．龟版提取物作用的各组MSCs的RARg．、VDR表达阳性细胞均显著高于对照组。 且呈剂量依赖性；作用24h后RARa表达达峰值，作用72h后VDR表达达峰值。 2．龟版提取物作用的各组MSCs增殖过程中，用免疫组化和免疫荧光方法均检测 不到ER、GR、PPAR8、TRa阳性反应细胞。 结论 龟版提取物促进MSCs增殖过程中激活R 是龟板促进MSCs增殖的药理靶点。 关键词龟版提取物：核受体；视黄酸受体；维生素D受体；骨髓间充质干细胞 ofExtractofPlastrumTestudinisOUNuclear Effect Receptor intheProliferationofRat StemCellinVitro Mesenchymal medicineoftraditionalChinesemedicine Specialty：Basic Shucai Author：Song YanCan Tutor：Professor Summary Research Objective： Nucleic isa of factor．Thenucleic receptorsupergroupligand-dependenttranscription