(1,3)-β-D-葡聚糖检测评价药物治疗真菌性角膜溃汤疗效的实验探究.pdfVIP

(1，3)一B-I)-葡聚糖检测评价药物治疗真菌性角膜溃疡疗 效的实验研究 摘要 目的：建立兔感染茄病镰刀菌的真菌性角膜炎模型，监测模型眼不同时 期泪液中(1，3)一B-D-葡聚糖的浓度变化，结合病变角膜组织中菌丝负 荷及角膜溃疡临床评分进行分析，讨论(1，3)一B—D一葡聚糖检测评价真 菌性角膜炎动物模型的可行性；通过药物治疗真菌性角膜炎动物模型， 观察(1，3)一B—D一葡聚糖在真菌性角膜炎愈合过程中的浓度变化，进一 步讨论(1，3)～13-D-葡聚糖评价药物治疗真菌性角膜炎疗效的应用，为 探索一种真菌性角膜炎无创筛查和定量评价手段提供理论依据。 方法：1．新西兰大耳白兔32只，随机选取16只为实验组，l6只为阴性 对照组。实验组采用角膜划痕法接种标准茄病镰刀菌株，制作真菌性角 膜炎动物模型，阴性对照组接种生理盐水。均为右眼接种，左眼为正常 5、2 对照组。每日行裂隙灯显微镜检查，于病程第3、7、1 1天进行临床 0u 评分，并分别收集三组泪液l L行(1，3)一B—D一葡聚糖浓度检测。分 别于上述各时间点随机选取实验组4只、阴性对照组4只经耳缘静脉栓 塞处死后，留取角膜组织行组织病理学检查。观察病情进展情况。 2．新西兰大耳白兔42只，按第一部分的方法，接种茄病镰刀菌，均为右 眼接神。从42只兔真菌性角膜炎模中挑选临床评分接近的36只进行实 验，随机分为治疗组18只、对照组l8只。治疗组自成模后第1天即予 5％那他霉素滴眼液点眼，对照组不予干预。分别于治疗前，治疗第3、5、 l0、l5、2 l天收集患眼泪液行(1，3)一每一D一葡聚糖浓度检测，并于上 述相同时间点随机选取治疗组3只、对照组3只处死后留取角膜组织， 以角膜溃疡为中心分作两份，一份行组织病理学检查，一份置于经高压 ern-blOt检测。观察抗真菌药物治 消毒的EP管中用于MMP一9蛋白WeSt 疗疗效。 结果：1．兔感染茄病镰刀菌性角膜炎模型建立成功，成功率100％。病程 第3、7、l5、2 l天，实验组泪液中(1，3)一13一D一葡聚糖浓度分别为(650．32 047．49±l 05．36)pg／InL、 ±97．63)pg／mL、(858．29±96．26)pg／mL、(1 (1679．47±1 24．42)pg／mL，而正常对照组和阴性对照组各时间点葡聚 从实验组(1，3)一B-D-葡聚糖浓度的变化来看，随着真菌性角膜炎病情 的进展，(1，3)一13一D一葡聚糖浓度随之升高，而角膜组织中真菌负荷未 增高，甚至有减少趋势。 ＼愀嬲 0、15、2 2．治疗组治疗第3、5、1 1天(1，3)一B—D一葡聚糖浓度分别为 06．54±19．87) (438．38±79．58)pg／mL、(194．39±23．54)pg／mL、(1 (58．36±1 O．39)pg／mL，(16．27±3．42)pg／mL；而对照组在病程第3 1天时升至 天时浓度为(554．56±92．26)pg／mL，随后逐日升高，至2 (1 894．47±l 56．47)pg／mL，两组间各检测时间点浓度差异均有显著统 l Western 计学意义(尸=27．65，227．96，尸0．01)。角膜组织中MMP一9 b1 o